颗粒蛋白前体对阿尔茨海默病的作用及其机制研究

发布时间：2022-02-22 15:33

　　阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease;AD）是一种以进行性的认知障碍和记忆障碍为特点的神经系统退行性疾病。目前研究认为β-淀粉样蛋白（Aβ）是导致阿尔茨海默病的关键因素。在阿尔茨海默病患者脑中,Aβ的生成和清除出现了严重的异常,导致Aβ水平升高,然后出现异常的沉积和神经毒性。颗粒蛋白前体（progranulin）是一种分泌性的糖基化蛋白质,在多种组织和器官中都有表达。在脑中,颗粒蛋白前体主要由小胶质细胞和神经元表达分泌,起着调控神经生存和神经炎症等方面的重要作用。颗粒蛋白前体基因突变会增加阿尔茨海默病的患病风险,已有研究指出颗粒蛋白前体敲除会加重阿尔茨海默病模型小鼠的相关病理,颗粒蛋白前体过表达可以减轻相关病理。但是利用颗粒蛋白前体蛋白直接给药是否能够改善阿尔茨海默病病理,还有颗粒蛋白前体对阿尔茨海默病病理的改善机制依然不清楚。为了回答相关问题,我们利用5xFAD模型小鼠和体外培养细胞进行了实验探究。我们发现相对于WT小鼠,3月龄的5xFAD小鼠脑内颗粒蛋白前体的含量增加,而6月龄和10月龄的小鼠脑内的含量减少。之后通过体外实验发现与阿尔茨海默病相关的突变基因（APP-... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省211工程院校985工程院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 阿尔茨海默病
        1.1.1 阿尔茨海默病介绍
        1.1.2 阿尔茨海默病与Aβ假说
        1.1.3 阿尔茨海默病与β-分泌酶
        1.1.4 阿尔茨海默病与炎症
        1.1.5 阿尔茨海默病与细胞凋亡
        1.1.6 阿尔茨海默病与小胶质细胞
    1.2 颗粒蛋白前体
        1.2.1 颗粒蛋白前体介绍
        1.2.2 颗粒蛋白前体与神经退行性疾病
        1.2.3 颗粒蛋白前体与炎症
        1.2.4 颗粒蛋白前体与神经保护
        1.2.5 颗粒蛋白前体与小胶质细胞
    1.3 颗粒蛋白前体的研究对阿尔茨海默病的意义
第二章 实验材料和实验方法
    2.1 实验动物
    2.2 实验器材、试剂及配方
        2.2.1 小鼠基因型鉴定实验器材、试剂和配方
        2.2.2 脑立体定位注射实验器材和试剂
        2.2.3 免疫荧光实验器材、试剂和配方
        2.2.4 细胞培养实验器材、试剂和配方
        2.2.5 Western blot实验试剂和配方
        2.2.6 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)器材和试剂
    2.3 实验方法
        2.3.1 5xFAD小鼠基因型鉴定
        2.3.2 小鼠脑立体定位注射
        2.3.3 小鼠脑片免疫荧光实验
        2.3.4 细胞免疫荧光实验
        2.3.5 细胞培养实验
        2.3.6 Western blot实验
        2.3.7 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验
        2.3.8 数据统计分析
第三章 实验结果
    3.1 Aβ病理相关因素对颗粒蛋白前体的影响
        3.1.1 5xFAD小鼠脑内Aβ沉积随着年龄增长而增多
        3.1.2 5xFAD鼠脑颗粒蛋白前体含量在Aβ病理早期增加后期降低
        3.1.3 过表达APP (swe)基因降低细胞内颗粒蛋白前体的含量
        3.1.4 Aβ_(42)寡聚体处理降低细胞内颗粒蛋白前体的含量
    3.2 颗粒蛋白前体对Aβ病理的影响
        3.2.1 颗粒蛋白前体给药降低5xFAD小鼠脑海马内Aβ斑块的沉积
        3.2.2 颗粒蛋白前体给药降低5xFAD小鼠脑海马内BACE1水平
        3.2.3 颗粒蛋白前体体外处理降低细胞BACE1表达水平
        3.2.4 颗粒蛋白前体处理降低细胞内APP-C末端(C99)水平
        3.2.5 颗粒蛋白前体处理未对细胞NF-κB信号通路产生明显影响
        3.2.6 颗粒蛋白前体处理未对细胞caspase-3通路产生明显影响
        3.2.7 颗粒蛋白前体脑内给药增强小胶质细胞对Aβ的吞噬能力
        3.2.8 颗粒蛋白前体增强原代培养小胶质细胞的吞噬能力
第四章 总结和讨论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Why microglia kill neurons after neural disorders? The friendly fire hypothesis[J]. Walace Gomes-Leal.  Neural Regeneration Research. 2019(09)
[2]Neurotrophic factors in Alzheimer’s and Parkinson’s diseases: implications for pathogenesis and therapy[J]. Tuane Bazanella Sampaio,Anne Suely Savall,Maria Eduarda Ziani Gutierrez,Simone Pinton.  Neural Regeneration Research. 2017(04)



本文编号：3639736