大鼠Kir6.2基因真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

发布时间：2022-02-28 19:49

　　研究目的ATP敏感型钾通道（ATP-sensitive potassium channels, KATP）是一种偶联细胞电活动和细胞代谢的特殊通道,在多种不同的组织广泛分布,KATP是由两种不同的亚基（Kir6.x和SURx）以1：1组合形成的异构八聚体,Kir6.x和SUR亚基之间的不同组合可以形成多种不同生理及药理学特征的通道。目前Kir6.2在阿尔茨海默病发生发展中的具体作用机制尚不是很清楚。本研究旨在通过克隆Kir6.2基因,成功构建真核表达载体pcDNA3.0/Kir6.2,并将重组质粒转染HEK293细胞,获得高表达Kir6.2基因的细胞克隆。研究方法1.从SD大鼠脑组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得Kir6.2基因的全长cDNA,经0.8%琼脂糖凝胶电泳进行初步鉴定,对目的PCR产物进行切胶回收。2.将回收的PCR产物插入pEASY-T1克隆载体,取阳性克隆进行序列测定。3.测序正确的质粒pEASY-T1/Kir6.2用限制内切酶HindⅢ和BamH I进行双酶切,纯化回收约1.2Kb大小的目的片段,质粒pcDNA3.0也进行HindⅢ和BamH I双酶切,纯化... 

【文章来源】：山东大学山东省211工程院校985工程院校教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

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结论
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【参考文献】：
期刊论文
[1]ATP敏感性钾通道分子结构和功能的组织特异性研究进展[J]. 朱庆磊,汪海,肖文彬.  中国药理学通报. 2001(02)
[2]ATP敏感钾通道亚单位在大鼠组织中的表达[J]. 任亚军,佟晓永,王晓良.  中国药理学通报. 2000(02)



本文编号：3645481