MK-801重复处理围产期或成年期大鼠建立的精神分裂症模型效度研究及致认知损害的KCC2机制初探

发布时间：2022-10-09 11:48

　　第一部分MK-801重复处理围产期或成年期大鼠建立的精神分裂症模型的行为学评价 目的:用Dizocilpine（MK-801）重复处理围产期或成年期大鼠建立精神分裂症（Schizophrenia,SZ）发育动物模型和慢性给药动物模型,通过对成年模型大鼠行为学改变的测评和比较,探讨两种SZ大鼠模型的表现效度及相关的病理机制。方法:新生雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠于出生后（Postnatal,P）6天随机分为3组:SZ发育模型组、SZ慢性给药模型组和对照组。SZ发育模型组大鼠于P7-10天皮下注射MK-801（0.1mg/kg,2次/天）;SZ慢性给药模型组大鼠于P47-60天腹腔注射MK-801（0.2 mg/kg,1次/天）;对照组大鼠于相应时段注射0.9%的生理盐水（Normal Sodium,NS）。P63天各组大鼠进行自发活动、强迫游泳、社会交往和Morris水迷宫行为学测试。结果:（1）SZ慢性给药模型组自发活动总路程显著大于对照组（P＜0.01）。（2）强迫游泳测试,两模型组不动时间较对照组显著延长（P＜0.05）。（3）社会交往测试,SZ发育模型组... 

【文章页数】：124 页

【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
第一部分 MK-801重复处理围产期或成年期大鼠建立的精神分裂症模型的行为学评价
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 实验药品、试剂和器材
        2.3 试验方法
            2.3.1 自发活动(Locomotion)
            2.3.2 强迫游泳(Forced Swimming test,FST)
            2.3.3 社会交往测试(Social Interaction test)
            2.3.4 Morris水迷宫(Morris Water Maze test,MWM)
            2.3.5 统计学处理
    3 结果
        3.1 两种SZ模型大鼠自发活动的比较
        3.2 两种SZ模型大鼠强迫游泳行为的比较
        3.3 两种SZ模型大鼠社会交往能力的比较
        3.4 两种SZ模型大鼠空间学习和参考记忆能力的比较
    4 讨论
        4.1 建立啮齿类SZ动物模型的依据和MK-801的剂量选择
        4.2 自发活动
        4.3 强迫游泳
        4.4 社会交往测试
        4.5 Morris水迷宫测试
    5 小结
第二部分 MK-801重复处理建立的两种SZ模型大鼠脑组织PV、GAD67和KCC2表达的比较
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 实验药品、试剂和器材
        2.3 试验方法
            2.3.1 免疫组织化学(Immunohistochemical analysis)
                2.3.1.1 组织灌注和脑片制备
                2.3.1.2 抗原检测
                2.3.1.3 免疫组织化学结果的观察与图像分析
            2.3.2 免疫印迹(Western blotting)
                2.3.2.1 组织取材
                2.3.2.2 蛋白质的提取和浓度测定
                2.3.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
                2.3.2.4 免疫印迹反应
            2.3.3 统计学处理
    3 结果
        3.1 两种SZ模型大鼠mPFC和海马CA1区PV表达的比较
        3.2 两种SZ模型大鼠mPFC区和海马CA1区GAD67表达的比较
        3.3 两种SZ模型大鼠mPFC和海马KCC2表达的比较
    4 讨论
        4.1 PV
        4.2 GAD67
        4.3 KCC2
    5 小结
第三部分 两种SZ模型大鼠脑组织DA、Glu及其代谢产物浓度的比较
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 实验药品、试剂和器材
        2.3 试验方法
            2.3.1 标准液和蛋白沉淀工作液的配制
            2.3.2 样品衍生液的配制
            2.3.3 脑组织匀浆样本制备及衍生化
            2.3.4 色谱条件
            2.3.5 统计学处理
    3 实验结果
        3.1 高效液相色谱-库仑阵列电化学检测下DA、DOPAC、Glu和GABA的色谱行为
        3.2 两种SZ模型大鼠mPFC区DA和DOPAC浓度的比较
        3.3 两种SZ模型大鼠海马DA和DOPAC浓度的比较
        3.4 两种SZ模型大鼠mPFC区Glu和GABA浓度的比较
        3.5 两种SZ模型大鼠海马Glu和GABA浓度的比较
    4 讨论
        4.1 DA和DOPAC
        4.2 Glu和GABA
        4.3 DA、Glu和GABA系统间的相互作用
    5 小结
第四部分 SZ发育模型成年大鼠海马脑片LTP的表达改变及KCC2的作用机制研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 实验药品、试剂和器材
        2.3 试验方法
            2.3.1 ACSF配置和预处理
            2.3.2 急性脑片的制备
            2.3.3 微电极的拉制
            2.3.4 灌流系统
            2.3.5 LTP诱导和记录
            2.3.6 免疫印记(Western blotting)
        2.4 统计学处理
    3 实验结果
        3.1 SZ发育模型成年大鼠海马脑片LTP表达变化及FURO和PTX的干预效应
        3.2 SZ发育模型成年大鼠海马脑片LTP诱导前后CA1区KCC2的表达变化及比较
    4 讨论
    5 小结
参考文献
附录
    综述 精神分裂症GABA系统紊乱和围产期NMDA受体阻断诱导机制研究进展
实验照片
致谢
攻读博士学位期间已发表和待发表的学术论文
    一、发表论文
    二、参研项目



本文编号：3688582