梓醇在老年性痴呆细胞模型中的应用研究
发布时间：2023-03-05 05:15
本研究采用原代细胞培养技术，以神经毒素β-淀粉样肽(Aβ1-42)诱导小鼠原代大脑皮层神经细胞损伤，构建老年性痴呆细胞模型，分析梓醇对老年性痴呆神经细胞的保护作用及其作用机制。 利用Aβ1-42诱导小鼠原代大脑皮层纯神经元凋亡，探讨梓醇对小鼠大脑皮层神经元的保护作用机制。大脑皮层纯神经元细胞经梓醇预孵育30min再和Aβ1-42作用72h后，检测梓醇对皮层神经元形态变化、caspase级联通路以及线粒体功能的调节作用。检测结果显示梓醇改善了损伤的细胞形态，有效减少了乳酸脱氢酶(LDH)的释放，抑制了caspase-3及乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的提高，减弱了细胞内钙离子超载、活性氧自由基(ROS)产生和线粒体膜电位的丧失，保护了线粒体功能免受损伤。这些结果表明，梓醇可能通过阻断caspase级联通路的激活，以及改善线粒体功能障碍而降低Aβ1-42对神经元产生的毒性损伤。 利用Aβ1-42诱导小鼠原代大脑皮层神经-胶质混合细胞，造成皮层神经元炎症损伤，探讨梓醇的抗炎症保护作用机...
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
1.1 老年性痴呆与细胞凋亡
1.1.1 细胞凋亡的特征
1.1.2 caspase及AChE在细胞凋亡过程中的作用
1.1.3 线粒体与细胞凋亡
1.2 胶质细胞的激活在AD形成过程中的作用
1.2.1 小胶质细胞和星型胶质细胞的特性
1.2.2 AD中神经胶质细胞激活的病理及对神经元细胞的损伤
1.3 老年性痴呆动物模型的研究进展
1.3.1 神经毒素Aβ在AD中毒性作用的发挥机制
1.3.2 几种常用的AD动物模型
1.4 针对老年性痴呆症的药物治疗现状
1.5 本论文的选题依据及研究内容
参考文献
2 梓醇对原代大脑皮层神经元细胞凋亡的保护作用研究
2.1 实验材料及设备
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 小鼠大脑皮层神经元细胞培养
2.2.2 免疫细胞化学染色
2.2.3 Aβ1-42对小鼠大脑皮层神经元细胞的损伤作用
2.2.4 Aβ1-42介导小鼠大脑皮层神经元细胞损伤后LDH的释放
2.2.5 caspase-3活性分析
2.2.6 乙酰胆碱酯酶(ACHE)活性分析
2.2.7 细胞内钙离子的测定
2.2.8 细胞内活性氧自由基(ROS)的测定
2.2.9 细胞线粒体膜电位的测定
2.2.10 统计学分析
2.3 实验结果
2.3.1 Aβ1-42对大脑皮层神经元细胞活力的影响
2.3.2 梓醇对Aβ1-42致大脑皮层神经元细胞内LDH漏出的影响
2.3.3 梓醇对Aβ1-42介导的大脑皮层神经元细胞损伤的保护作用
2.3.4 梓醇对Aβ1-42诱导皮层神经元凋亡时caspase-3和AChE活力的影响
2.3.5 梓醇调节了Aβ1-42介导的大脑皮层神经元细胞内Ca2+失衡
2.3.6 梓醇抑制了Aβ1-42诱导的大脑皮层神经元细胞内ROS的产生
2.3.7 梓醇改善了Aβ1-42导致的大脑皮层神经元线粒体膜电位降低
2.4 讨论
2.5 小结
参考文献
3 梓醇对Aβ1-42介导的大脑皮层神经元炎症损伤的保护作用研究
3.1 实验材料及设备
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 小鼠原代大脑皮层神经-胶质细胞培养
3.2.2 纯小胶质细胞培养
3.2.3 纯星型胶质细胞培养
3.2.4 免疫染色
3.2.5 乳酸脱氢酶(LDH)的测定
3.2.6 小胶质细胞中活性氧自由基的测定
3.2.7 酶联免疫法检测小胶质细胞中肿瘤坏死因子(TNF-α)的释放
3.2.8 星型胶质细胞中一氧化氮的(nitric oxide,NO)的测定
3.2.9 星型胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的测定
3.2.10 统计学分析
3.3 实验结果
3.3.1 皮层神经-胶质细胞体系中梓醇对Aβ1-42介导的神经元损伤的保护作用
3.3.2 梓醇对Aβ1-42介导的小胶质细胞激活的抑制作用
3.3.3 梓醇抑制激活的小胶质细胞产生炎症因子
3.3.4 梓醇抑制星型胶质细胞的激活
3.4 讨论
3.5 小结
参考文献
结论
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
本文编号：3755775
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
1.1 老年性痴呆与细胞凋亡
1.1.1 细胞凋亡的特征
1.1.2 caspase及AChE在细胞凋亡过程中的作用
1.1.3 线粒体与细胞凋亡
1.2 胶质细胞的激活在AD形成过程中的作用
1.2.1 小胶质细胞和星型胶质细胞的特性
1.2.2 AD中神经胶质细胞激活的病理及对神经元细胞的损伤
1.3 老年性痴呆动物模型的研究进展
1.3.1 神经毒素Aβ在AD中毒性作用的发挥机制
1.3.2 几种常用的AD动物模型
1.4 针对老年性痴呆症的药物治疗现状
1.5 本论文的选题依据及研究内容
参考文献
2 梓醇对原代大脑皮层神经元细胞凋亡的保护作用研究
2.1 实验材料及设备
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 小鼠大脑皮层神经元细胞培养
2.2.2 免疫细胞化学染色
2.2.3 Aβ1-42对小鼠大脑皮层神经元细胞的损伤作用
2.2.4 Aβ1-42介导小鼠大脑皮层神经元细胞损伤后LDH的释放
2.2.5 caspase-3活性分析
2.2.6 乙酰胆碱酯酶(ACHE)活性分析
2.2.7 细胞内钙离子的测定
2.2.8 细胞内活性氧自由基(ROS)的测定
2.2.9 细胞线粒体膜电位的测定
2.2.10 统计学分析
2.3 实验结果
2.3.1 Aβ1-42对大脑皮层神经元细胞活力的影响
2.3.2 梓醇对Aβ1-42致大脑皮层神经元细胞内LDH漏出的影响
2.3.3 梓醇对Aβ1-42介导的大脑皮层神经元细胞损伤的保护作用
2.3.4 梓醇对Aβ1-42诱导皮层神经元凋亡时caspase-3和AChE活力的影响
2.3.5 梓醇调节了Aβ1-42介导的大脑皮层神经元细胞内Ca2+失衡
2.3.6 梓醇抑制了Aβ1-42诱导的大脑皮层神经元细胞内ROS的产生
2.3.7 梓醇改善了Aβ1-42导致的大脑皮层神经元线粒体膜电位降低
2.4 讨论
2.5 小结
参考文献
3 梓醇对Aβ1-42介导的大脑皮层神经元炎症损伤的保护作用研究
3.1 实验材料及设备
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 小鼠原代大脑皮层神经-胶质细胞培养
3.2.2 纯小胶质细胞培养
3.2.3 纯星型胶质细胞培养
3.2.4 免疫染色
3.2.5 乳酸脱氢酶(LDH)的测定
3.2.6 小胶质细胞中活性氧自由基的测定
3.2.7 酶联免疫法检测小胶质细胞中肿瘤坏死因子(TNF-α)的释放
3.2.8 星型胶质细胞中一氧化氮的(nitric oxide,NO)的测定
3.2.9 星型胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的测定
3.2.10 统计学分析
3.3 实验结果
3.3.1 皮层神经-胶质细胞体系中梓醇对Aβ1-42介导的神经元损伤的保护作用
3.3.2 梓醇对Aβ1-42介导的小胶质细胞激活的抑制作用
3.3.3 梓醇抑制激活的小胶质细胞产生炎症因子
3.3.4 梓醇抑制星型胶质细胞的激活
3.4 讨论
3.5 小结
参考文献
结论
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
本文编号：3755775
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