二十二碳六烯酸（DHA）通过RIPK1/RIPK3信号通路抑制Aβ25-35刺激的THP-1单核细胞的程序性坏死

发布时间：2024-01-27 00:05

　　研究背景阿尔茨海默病(AD)的神经病理学特征包括老年斑、神经原纤维缠结和突触丢失。AD造成的原因至少部分是由β淀粉样蛋白(Aβ)蛋白产生和和清除障碍失衡,从而导致Aβ积累在中枢神经系统(CNS)。二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的多不饱和脂肪酸(PUFA),临床前研究和临床研究表明,DHA对包括AD在内的几种神经退行性疾病具有神经保护作用。与单核细胞相比,小胶质溶酶体酶活性水平较低,降解Aβ斑块的能力有限。单核细胞在AD的清除中起到至关重要的作用。因此还需要更多的研究来阐明DHA如何通过单核细胞促进Aβ清除潜在清除机制。程序性坏死(Necroptosis)由RIPK1、RIPK3和MLKL调节。不同于细胞凋亡以及传统细胞坏死的细胞死亡方式,其涉及包括AD在内的多种神经退行性疾病。NF-κB在调节免疫和炎症反应起着关键的作用,而蛋白激酶MAPKs是参与包括细胞生存、细胞凋亡和细胞对炎症的反应关键调节因素。同时,程序性坏死通路和MAPKs、NF-kB在单核细胞中的信号通路的潜在相互机制需进一步研究。研究目的本研究的目的是进一步探讨单核细胞与Aβ相互作用的可能机制及DHA所涉及的机制。同时...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 材料和方法
    2.1 实验材料
    2.2 试剂配制及材料准备
    2.3 THP-1单核细胞、SY5Y神经元细胞及原代神经元细胞的培养
    2.4 实验分组
    2.5 CCK-8法细胞存活率检测
    2.6 LDH法细胞死亡率检测
    2.7 Transwell迁移实验评估THP-1单核细胞的迁移能力
    2.8 流式检测细胞凋亡/坏死及分化
    2.9 细胞总蛋白的提取
    2.10 BCA法蛋白浓度的测定
    2.11 蛋白免疫印迹(Western Blotting,WB)
    2.12 统计分析
第三章 结果
    3.1 Aβ25-35对THP-1单核细胞活性有“Hormesis”效应
    3.2 Aβ25-35对THP-1单核细胞程序性坏死有“Hormesis”效应,并且Aβ25-35 影响THP-1单核细胞的分化
    3.3 DHA抑制Aβ25-35刺激的THP-1单核细胞活性下降
    3.4 DHA减弱Aβ25-35刺激的THP-1单核细胞介导的神经元细胞损伤
    3.5 DHA抑制Aβ25-35刺激的THP-1单核细胞迁移能力的下降
    3.6 DHA抑制Aβ25-35刺激的THP-1单核细胞中促炎介质的表达
    3.7 DHA抑制Aβ25-35刺激的THP-1单核细胞程序性坏死
    3.8 DHA通过RIPK1抑制Aβ25-35刺激的THP-1单核细胞的程序性坏死
    3.9 DHA抑制Aβ25-35刺激的THP-1单核细胞的ERK1/2的磷酸化蛋白表达水平,而不影响P65、P38的蛋白表达水平
    3.10 DHA抑制Aβ25-35刺激的THP-1细胞的ERK1/2信号通路的激活,可能与RIPK1有关
第四章 讨论
    4.1 Aβ25-35对THP-1单核细胞活性的影响
    4.2 Aβ25-35通过THP-1单核细胞介导对原代神经元细胞活性的影响
    4.3 Aβ25-35对THP-1单核细胞的机制研究及DHA调控作用的机制探索
    4.4 本研究的不足与改进
第五章 全文小结
参考文献
攻读学位期间成果
缩写词简表
致谢



本文编号：3885941