中枢钾离子通道在β-淀粉样肽致痴呆大鼠中的改变及钾通道调节剂的筛选与研究

发布时间：2024-02-02 14:21

　　阿尔茨海默氏病(AD)是老年性痴呆的最常见原因，主要表现为进行性的认知功能下降。有关AD发病机制的研究虽然取得了一些成果，提出了一系列AD的病理学假说，但是这些假说都还不能完全解释AD的发病机制，大量研究表明AD是多病因及其相互作用的结果。由于神经元的兴奋性与钾通道活性直接相关，本课题组前期工作也证实在胆碱能损伤的痴呆动物模型中钾通道活性发生了变化，提示钾通道可能是AD病理变化的重要位点之一。钾通道是已知各种通道中家族最为庞大、分类最为复杂的一类通道，在决定神经元静息膜电位、调节细胞兴奋性及调控神经元间的突触联系中发挥重要作用。已有的研究发现中枢神经系统中有大量钾离子通道的表达分布，而且它们的活性与神经系统的功能作用密切相关，如在学习记忆、脑损伤等过程中都有钾通道的直接参与。随着分子生物学技术的不断发展，各种钾通道亚型陆续被发现，有关这些亚型的功能性差异以及组织分布的研究已有许多报道，但是钾通道亚型的表达与功能水平在AD发生、发展过程中的变化尚未见报道，而此工作在发现治疗老年性痴呆新靶点和发现新药方面意义重大。目前在临床上已经有一些药物用于AD的预防和治疗，但是这些药物的疗效都还不能完...

【文章页数】：136 页

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英文缩略词
研究论文：“中枢钾离子通道在β-淀粉样肽致痴呆大鼠中的改变及钾通道调节剂的筛选与研究”
    中文摘要
    英文摘要
第一部分：中枢钾离子通道在β-淀粉样肽致痴呆大鼠中的改变
    前言
    材料和方法
    结果
        1.Morris水迷宫实验
        2.侧脑室注射Aβ_25-35对大鼠大脑皮层钾通道亚型mRNA表达的影响
        3.侧脑室注射Aβ_25-35对大鼠大脑海马钾通道亚型mRNA表达的影响
        4.侧脑室注射Aβ_25-35对大鼠大脑皮层和海马组织钾通道亚型蛋白表达的影响
        5.侧脑室注射Aβ_25-35对大鼠海马锥体神经元I₍K(DR))电流密度及其稳态激活动力学的影响
        6.侧脑室注射Aβ_25-35对大鼠海马锥体神经元I₍K(A))电流密度及其稳态动力学的影响
    讨论
    结论
第二部分：乙酰胆碱酯酶抑制剂对钾通道的药理学作用研究
    前言
    第一节 Rivastigmine对大鼠海马锥体神经元电压依赖性钾电流的作用和意义
        材料和方法
        结果
            1.不同浓度rivastigmine对急性分离大鼠海马锥体神经元I₍K(A))和I₍K(DR))电流的影响
            2.Rivastigmine对I₍K(A))和I₍K(DR))稳态激活的电压依赖性的影响
            3.Rivastigmine对I₍K(A))和I₍K(DR))稳态失活的电压依赖性的影响
            4.Rivastigmine对I₍K(A))失活后恢复的影响
        讨论
    第二节 Galantamine对大鼠海马锥体神经元电压依赖性钾电流的作用和意义
        材料和方法
        结果
            1.不同浓度galantamine对急性分离大鼠海马锥体神经元I₍K(A))和I₍K(DR))电流的影响
            2.Galantamine对I₍K(A))和I₍K(DR))稳态激活的电压依赖性的影响
            3.Galantamine对I₍K(DR))稳态失活的电压依赖性的影响
        讨论
    结论
第三部分：钾通道调节剂高通量筛选的细胞模型
    前言
    材料和方法
    结果
        1.荧光染料DiBAC₄(3)的荧光反应性
        2.阳性钾通道调节剂引起的荧光强度变化
            2.1 高钾去极化,经典钾通道阻断剂4-AP和TEA引起的荧光强度变化
            2.2 钾通道阻断剂E-4031、glibenclamide和钾通道开放剂cromakalim引起的荧光强度变化
            2.3 具有钾通道阻断作用的Na⁺阻断剂quinidine和Ca²⁺阻断剂nifedipine引起的荧光强度变化
            2.4 具有钾通道阻断作用的乙酰胆碱酯酶抑制剂rivastigmine和galantamine引起的荧光强度变化
        3.运用该细胞模型对76个待筛化合物进行初步筛选
        4.运用该细胞模型对15个化合物进行复筛
        5.全细胞膜片钳技术对上述9个化合物进行电流功能检测和筛选
    讨论
论文总结
参考文献
个人简历
发表及完成的论文
致谢
原创性及知识产权声明



本文编号：3892809