芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠认知障碍的影响及机制的研究

发布时间：2017-05-29 03:09

  本文关键词：芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠认知障碍的影响及机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景及目的： 血管性认知障碍是严重危害人类健康的疾病之一，临床上有发病率高，起病隐匿，进行性加重，病程漫长等特点。而慢性脑缺血是血管性认知障碍的一个重要因素。目前研究证实慢性脑缺血可引起能量代谢障碍、葡萄糖利用减少、神经递质改变、脑白质损害和神经元缺失等改变，这些改变恰恰构成了慢性脑缺血所致的认知功能障碍的病理生理学基础。其中神经元缺失与氧化应激、免疫炎症及细胞凋亡等因素有关。MDA、SOD是反映抗氧化应激机制的重要指标，Caspase-3是细胞凋亡的关键蛋白酶，故可作为缺血性脑损伤的治疗靶点。 现代医学对此类疾病的治疗都是针对于某一环节、某一机制，临床效果并不满意。目前认为早期的预防和治疗是该病的主要原则。 现代研究显示：祖国医学治疗疾病具有多靶点、多途径的特点，在早期预防和治疗方面有一定的优势。中医中没有血管性认知功能障碍这样的病名，但却有很多与之相关的病因、病症的描述，从血管性认知障碍的病症特点来看，应属于“文痴”、“善忘”、“痴呆”、“神呆”、“愚痴”等病证范畴。其病机主要是肾虚髓亏为本，同时涉及五脏，血瘀痰浊阻滞为标，气虚血瘀是重要的发病机制。芪丹通脉片是在中医传统气血理论指导下的一个中药复方制剂，具有益气活血，温经通络等作用，既往临床和实验研究表明该药有改善心肌供血、减小心梗面积等作用，对急性脑缺血再灌注损伤也有一定的作用，但从未有过慢性脑缺血方面的研究。为此，本实验以永久性结扎大鼠双侧颈总动脉（2-VO）制成慢性脑缺血实验模型，首次观察了芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠认知功能中学习记忆的影响，观察芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠脑组织病理形态学的影响，并从抗氧化应激和抑制细胞凋亡方面对可能的神经保护机制进行了探讨。 研究方法和内容： 健康雄性SD大鼠56只，按完全随机分组，分为7组，分别是：空白对照组（control）、假手术组(Sham)、模型组(2-VO Model)、芪丹通脉片低剂量组(QDTMTL)、芪丹通脉片中剂量组（QDTMTM)、芪丹通脉片高剂量组(QDTMTH)、尼莫地平组(Nimodipine),每组8只，除空白对照组和假手术组外，其余各组大鼠均采用2-VO法制造慢性脑缺血模型，造模后适应性喂养2天，第3天起各组动物每日灌胃给药。假手术组及模型组给以生理盐水10ml/kg/d，QDTMTL、QDTMTM、QDTMTH组分别给予芪丹通脉片0.36g/kg/d、1.08g/kg/d、3.24g/kg/d及尼莫地平组给予尼莫地平6mg/kg/d,加生理盐水配成等体积药液灌胃，每日一次，连用28天。28天后行水迷宫定向航行实验和空间探索实验，观察慢性脑缺血大鼠学习记忆能力的改变，随后抽取2只大鼠行大脑切片，并作HE染色观察海马神经元形态变化，另6只大鼠断头取脑，提脑蛋白，检测SOD、MDA含量，用Wester-blot检测海马活性Caspase-3的表达。 实验结果： 1．在Morris水迷宫定位航行实验反映大鼠的学习能力，游泳训练的第1天和第2天，各组大鼠的平均逃避潜伏期没有明显差异，然而从第3天起，对照组与模型组、治疗组大鼠的逃避潜伏期有明显的区别：各治疗组大鼠逃避潜伏期明显降低，其中高剂量治疗组效果最好，其疗效接近于阳性对照组。 2．水迷宫空间探索实验反映了5天游泳训练后大鼠记忆能力的状况，结果显示：各个处理组大鼠空间记忆能力区别明显，与对照组（normal和sham）相比，模型组大鼠在目的象限停留时间明显减少（P＜0.05），各治疗组大鼠在目的象限停留时间多于模型组，其中高剂量组大鼠在目的象限停留时间更多。 3．HE染色：模型组海马CA1区呈现出典型的神经病理性改变，海马区神经细胞数量减少、固缩等改变，无梗死表现，空白对照组、假手术组大鼠海马CA1区结构正常、神经元大小、排列正常，药物处理对缺血大鼠海马CA1区组织结构改善明显，其中高剂量组效果最好。 4．海马MDA、SOD含量：模型组大鼠海马组织中SOD活性显著下降，MDA含量明显升高，干预组脑缺血大鼠海马部位SOD活性较模型组显著升高，MDA含量较模型组有所下降，有统计学意义，其中高剂量药物效果明显，接近于尼莫地平组，低、中剂量药物组效果不及高剂量药物组。 5．海马活性Caspase-3含量结果表明，模型组海马部位活性Caspase-3表达明显增加，各治疗组治疗后海马部位的活性Caspase-3表达下降，，高剂量组明显低于低、中剂量组，但接近于阳性对照组。 结论和提示： 1．QDTMT可显著改善慢性脑缺血所致的认知功能障碍，高剂量组效果最佳，提示该药可用于防治血管性认知功能障碍。 2．QDTMT能减轻慢性脑缺血大鼠海马区MDA含量升高及SOD活性下降，提示其可能通过减轻海马区的氧化应激水平保护海马组织，进而改善认知功能障碍。 3．QDTMT能显著降低慢性脑缺血大鼠海马区活化caspase-3的表达，提示其可能通过减轻海马区细胞凋亡保护海马组织，进而改善认知功能障碍。
【关键词】：芪丹通脉片 慢性脑缺血 学习记忆 Morris 水迷宫 氧化应激 凋亡
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R285.5;R749.1
【目录】：

• 缩略语表6-8
• 中文摘要8-12
• Abstract12-17
• 前言17-20
• 文献回顾20-39
• 1. 慢性脑缺血与血管性认知障碍20-24
• 2. 中医对血管性认知障碍的认识及研究进展24-35
• 3 芪丹通脉片临床及基础研究进展35-39
• 1 材料39-42
• 1.1 实验动物39
• 1.2 主要试剂与药物39-40
• 1.3 主要实验器材40
• 1.4 试剂配制40-42
• 2 实验方法42-46
• 2.1 动物模型的复制及实验分组42-43
• 2.2 学习记忆力测试43-44
• 2.3 取材44-45
• 2.4 蛋白提取45
• 2.5 丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的检测45
• 2.6 Western blot 测定活性 caspase-345-46
• 2.7 统计学方法46
• 3 结果46-53
• 3.1 芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠学习记忆的影响46-49
• 3.2 芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠海马病理形态学的影响49-50
• 3.3 芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠海马组织 MDA、SOD 的影响50-52
• 3.4 芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠海马部位活性 caspase-3 水平变化的影响52-53
• 4. 讨论53-59
• 小结59-60
• 参考文献60-71
• 个人简历和研究成果71-72
• 致谢72

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 谢道俊;靳伟;;中医药防治血管性痴呆机理研究[J];中医药临床杂志;2010年11期

2 尹艳艳;公惠玲;李维祖;;黄芪总苷对血管性痴呆小鼠学习记忆功能的影响[J];安徽医药;2009年09期

3 葛朝亮;汪宁;;开窍药对血管性痴呆的作用机制研究进展[J];安徽医药;2011年03期

4 孙冰;吴江;周春奎;房绍宽;;步长脑心通对慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠认知功能及神经细胞凋亡的影响[J];吉林大学学报(医学版);2007年02期

5 范文辉,刘之荣,李露斯;血管性痴呆的动物模型及其胆碱能机制研究[J];第三军医大学学报;2000年04期

6 马世平,王宗仁,龙铟,行利,李军昌,方坤泉;芪丹通脉片对高脂血症的药理作用[J];第四军医大学学报;2000年04期

7 李晶华,王宗仁,肖铁卉,邵中军,马静,郑谨,马爱玲,龙铟,王文,李军昌;芪丹通脉片预防异丙肾上腺素所致的大鼠慢性心肌缺血[J];第四军医大学学报;2003年05期

8 王宗仁,马静,行利,马世平,陈晓莉,樊爱琳,李晶华,肖铁卉,郑谨;芪丹通脉片对大鼠心肌线粒体损伤的保护作用[J];第四军医大学学报;2003年05期

9 龙铟,刘莉,王宗仁,夏天,马世平,陈学福,梅其炳,晏培松;中药芪丹通脉片对心肌损伤大鼠血小板功能的影响[J];第四军医大学学报;2003年05期

10 行利,马静,王宗仁,杨喜忠,马世平,李萌萌,肖铁卉,李晶华,郑谨;芪丹通脉片对大鼠急性心肌缺血损伤的影响[J];第四军医大学学报;2003年05期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 郑萍;当归对慢性脑缺血大鼠认知功能损害的神经保护作用研究[D];武汉大学;2004年

  本文关键词：芪丹通脉片对慢性脑缺血大鼠认知障碍的影响及机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：404023