Egr-1对APP基因表达的调控作用

发布时间：2017-06-30 00:13

  本文关键词：Egr-1对APP基因表达的调控作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：该研究构建了含有APP启动子的荧光素酶报告质粒以及缺失突变的报告质粒,将该质粒与Egr-1真核表达载体p CDNA3-Egr-1共转染到HEK293与U87MG细胞中进行荧光素酶活性测定,以确定Egr-1对APP基因表达的调控作用。通过染色质免疫共沉淀实验(chromatin immunoprecipitation assay,Ch IP)和凝胶电泳迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)确定Egr-1蛋白在APP启动子上的结合部位,同时利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA(trichostatin A)和butyrate诱导内源性Egr-1的表达以及Egr-1抑制剂suramin来作用于细胞,通过蛋白免疫印迹分析(Western blot)检测Egr-1对APP蛋白表达的作用。结果显示,Egr-1蛋白在APP基因启动子上5′UTR区域有特异性的结合部位,去除该结合部位则Egr-1失去对APP基因启动子的调控作用,Ch IP和EMSA的结果也证实了该结合位点;通过HDAC抑制剂和suramin干扰内源性Egr-1的表达则显著影响了Egr-1对APP基因表达的调控作用。
【作者单位】： 宁夏颅脑疾病重点实验室 省部共建国家重点实验室培育基地;宁夏医科大学基础医学院;
【关键词】： Egr- 淀粉样前体蛋白 阿尔茨海默病 基因表达调控
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划)(批准号:2012CB722408) 国家自然科学基金(批准号:81260197)资助的课题~~
【分类号】：R749.16
【正文快照】： #共同第一作者网络出版时间:2014-12-19 11:55 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20141219.1155.001.html阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种不可逆转的、渐进性的神经损害性疾病,缓慢地引起记忆和思维能力的衰退[1]。AD的发病机理至今尚未明确,但经

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