治疗阿尔兹海默病的新型内源性大麻素类似物N-硬脂酰酪氨酸盐成药性研究

发布时间：2017-07-06 23:16

  本文关键词：治疗阿尔兹海默病的新型内源性大麻素类似物N-硬脂酰酪氨酸盐成药性研究

  更多相关文章： N-硬脂酰酪氨酸 阿尔兹海默病 成药性研究 高效液相色谱法 药物代谢动力学 安全性评估

【摘要】：阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)又名老年性痴呆,是一种常见于老年人群的原发性中枢神经系统变性疾病,AD递进性地危害老年人认知能力,直至病人因最终丧失自理能力而死亡。现临床针对AD的治疗药物多具有严重的不良反应或毒副作用,且治疗效果不佳。因而开发新型的防治AD的药物已成为当务之急。N-花生四烯酰乙醇胺(AEA)是最早报道的内源性大麻素,具有广泛的生理作用,可有效干预多种退行性神经疾病进程的多个环节,具有神经保护作用。但AEA被证明不宜直接药用。N-硬脂酰酪氨酸(N-stearoyltyrosine,NsTyr)是拟AEA的长链脂肪酰氨基酸,体内外活性实验证明,NsTyr能有效对抗多种药理模型的神经损伤(大鼠脑片缺氧缺糖损伤、原代神经细胞谷氨酸损伤、PC12细胞氧化应激损伤模型和沙土鼠慢性低灌注、急性全脑缺血再灌注模型等),其神经保护作用呈现剂量依赖性。针对具有良好应用前景的该治疗AD药物的候选化合物进行的成药性研究包括:药物合成路线优化、理化性质研究、稳定性测评等临床前药学研究、药物代谢动力学研究及体外安全性评估等,对NsTyr的深度研发具有重要的应用价值。本文首次报道了百克级NsTyr盐的合成方法及工艺;并确立了体内、体外检测样品中NsTyr及其盐的高效液相色谱检测方法。该方法具有操作便捷、灵敏度高、专属性强,成本低廉等特点,并已应用于NsTyr及其盐的理化性质评估,稳定性测评、药物代谢动力学研究等。本文还开展了细胞毒性、遗传毒性、心脏毒性及生殖毒性实验等安全性评估实验。根据上述合安全性评估实验结果和早期急性毒性实验结果还对NsTyr及其盐做了用药安全及其治疗窗口的评估。本文建立的检测方法所涉及的各项检测指标均通过方法学验证,可满足体内外样品中NsTyr及其盐的定量分析要求。通过比较NsTyr及其盐各项检测指标,我们证明NsTyr盐的理化性质及药动学性质上较原型药物有明显的改善,研究表明NsTyr在水中的溶解度为27.62±0.43 mg/L、其二钾盐NsTyr-2K、二钠盐NsTyr-2Na的溶解度分别提高至51.70±0.29 mg/L和92.65±0.52 mg/L;NsTyr与NsTyr-2K的血浆蛋白结合率分别为22.79%±3.26%、38.46%±4.58%;主要药动学参数达峰时间Tmax分别为0.75±0.24 h、0.60±0.17 h,峰浓度Cmax分别为0.11±0.48μg/ml、2.40±0.33μg/ml,半衰期T1/2分别为1.49±0.96 h、2.90±0.75 h,72小时内曲线下面积AUC0-72分别为0.13±0.09μg*h/ml、3.49±0.61μg*h/ml。毒性评估实验表明,NsTyr及其盐在正常人肝细胞Chang liver cell的IC50为62μmol/L,且对细胞增殖的抑制作用与时间无关。生殖毒性实验中,自然染毒的SD大鼠及器官的各项生理指标(体重、脏器系数,精子及卵巢功能等)表明NsTyr及其盐对大鼠生殖无生殖毒性。遗传毒性Ames实验中NsTyr及其盐对平皿中菌斑无明显抑制作用,表明该化合物无导致生物体遗传物质发生畸变的不良作用。心脏毒性实验中未观察到明显转染hERG钾离子通道的CHO细胞出现hERG阻断或QT间期延长,推测该类化合物无诱发室性心动过速的毒性作用。综上所述,本文从临床前药学研究、药物代谢动力学研究及早期安全性评估三个方面对NsTyr及其盐进行系统的成药性研究,证明NsTyr盐较其原型的理化常数及药动学参数等性质上改善,使前者成为安全性高,同时兼具良好成药性质和生物活性的优质候选药物。为该类化合物系统临床前和临床研究奠定了基础及开发依据。
【关键词】：N-硬脂酰酪氨酸 阿尔兹海默病 成药性研究 高效液相色谱法 药物代谢动力学 安全性评估
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 前言11-15
• 第一章 N-硬脂酰酪氨酸及其盐的临床前药学研究15-41
• 材料与方法17-25
• 1 实验材料17-18
• 2 实验方法18-25
• 结果25-39
• 讨论39-41
• 第二章 N-硬脂酰酪氨酸及其盐的药物代谢动力学研究41-59
• 材料与方法42-47
• 1 实验材料42-43
• 2 实验方法43-47
• 结果47-57
• 1 方法学验证47-52
• 2 血浆蛋白结合率52-53
• 3 血药浓度测定53-57
• 讨论57-59
• 第三章 N-硬脂酰酪氨酸早期安全性评估59-86
• 材料与方法60-69
• 1 实验材料60-61
• 2 实验方法61-69
• 结果69-84
• 1 细胞毒性实验69-71
• 2 遗传毒性实验71-78
• 3 心脏毒性实验78-79
• 4 生殖毒性实验79-84
• 讨论84-86
• 结论86-88
• 参考文献88-93
• 致谢93-95
• 硕士期间已（待）发表的论文95

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 Umber Saleem;Sohail Ejaz;Muhammad Ashraf;Muhammad Ovais Omer;Imran Iltaf;Zainab Batool;Riffat Fatima;Msbah Afzal;;Mutagenic and cytotoxic potential of Endosulfan and Lambda-cyhalothrin—In vitro study describing individual and combined effects of pesticides[J];Journal of Environmental Sciences;2014年07期

2 Talambedu Usha;Sushil Kumar Middha;Arvind Kumar Goyal;Mahesh Karthik;DA Manoj;Syed Faizan;Peyush Goyal;HP Prashanth;Veena Pande;;Molecular docking studies of anti-cancerous candidates in Hippophae rhamnoides and Hippophae salicifolia[J];The Journal of Biomedical Research;2014年05期

3 王晓萌;张萍;钟儒刚;汪杨俊琦;;Ames试验的剂量效应关系及统计学方法探讨[J];中国卫生检验杂志;2013年15期

4 Zhichun Chen;Chunjiu Zhong;;Oxidative stress in Alzheimer's disease[J];Neuroscience Bulletin;2014年02期

5 纪圣君;刘晶;邓晶晶;李文军;金英;韩爽;刘举;周云鹏;徐利锋;王洋;陈烨;;藤甲酰苷的急性毒性、遗传毒性和生殖毒性[J];中国新药与临床杂志;2014年10期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 盛鹏飞;硒蛋白W与低硒致鸡脑损伤的相关性研究[D];东北农业大学;2014年

2 姜新义;功能小分子修饰的长循环碳酸酯纳米粒对脑胶质瘤分级靶向递药研究[D];复旦大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前6条

1 潘丽波;某地区水环境遗传毒性监测和风险评估[D];中国环境科学研究院;2013年

2 孔晓军;阿司匹林丁香酚酯的致畸致突变研究[D];中国农业科学院;2013年

3 王晓萌;环境污染物联合致突变作用评价方法的研究[D];北京工业大学;2013年

4 杨薇;鳓鱼甘油单酯及其衍生物的化学和生物学研究[D];浙江大学;2014年

5 张雪芹;烯糖的合成及生物活性研究[D];山西农业大学;2014年

6 谭建;以艾姆斯试验检测模拟煎炸油毒性的研究[D];仲恺农业工程学院;2014年

，

本文编号：528096