产前应激加剧慢性子代应激诱导的成年子鼠学习记忆损伤及机制研究

发布时间：2017-07-18 02:00

  本文关键词：产前应激加剧慢性子代应激诱导的成年子鼠学习记忆损伤及机制研究

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【摘要】：目的:探讨产前应激是否进一步加剧慢性应激所致的6月龄雄性APPswe/PS1d E9子鼠学习记忆损伤及其可能机制。方法:以APPswe/PS1d E9双转基因小鼠为研究对象,实验分成产前慢性应激-子代慢性应激组(TT组)、产前慢性应激-子代正常处理组(TC组)、产前正常处理-子代慢性应激组(CT组)和产前正常处理-子代正常处理组(CC组)。应用Morris水迷宫检测子代小鼠的空间学习、记忆能力;通过HE染色观察小鼠海马CA3区神经元的病理组织形态;运用IHC的方法,定位、半定量检测海马CA3区淀粉样前体蛋白(APP)、淀粉样前体蛋白β位点裂解酶1(BACE1)和β-淀粉样蛋白肽1-42(Aβ42)的表达状况;采用Congo red染色检查小鼠脑组织中的淀粉样斑块;采用Western blot法定量检测小鼠海马组织中APP、BACE1以及Aβ42的表达量;运用ELISA法测定血清皮质酮水平。结果:1.水迷宫结果显示与CC组相比,CT组小鼠的逃避潜伏期和游泳距离延长(P0.05)、平台象限游泳时间和穿越平台次数减少(P0.05);与CT组相比,TT组小鼠的逃避潜伏期和游泳距离进一步延长(P0.05)、平台象限游泳时间和穿越平台次数进一步减少(P0.05)。2.HE染色结果显示与CC组相比,CT组小鼠海马CA3区损伤的神经元数目明显增多(P0.05),排列疏松紊乱,细胞体略小,核固缩、浓染;与CT组相比,TT组小鼠的海马CA3区损伤的神经元数目进一步增多(P0.05)。3.IHC结果显示与CC组相比,CT组小鼠海马CA3区组织APP、BACE1和Aβ42蛋白的表达量升高(P0.05);与CT组相比,TT组小鼠海马CA3区组织有更多的APP、BACE1和Aβ42的表达(P0.05)。4.Congo red染色结果显示四组小鼠的前额叶皮质均有观察到明显的橘红色淀粉样斑块沉积,TT组小鼠的前额叶皮质的淀粉样斑块数量明显多于CT组、TC组和CC组。然而,四组小鼠的海马组织中淀粉样斑块数量稀少,只在CT组和TT组的个别切片上观察到。5.Western blot结果显示与CC组相比,CT组小鼠海马组织APP、BACE1和Aβ42蛋白的表达量升高(P0.05);与CT组相比,TT组小鼠海马组织有更多的APP和Aβ42的表达(P0.05);至于海马组织中BACE1的表达量,TT组较CT组虽无统计学差异,但有增多的趋势(P=0.055)。6.ELISA结果显示CT组小鼠较CC组相比,血清皮质酮浓度升高(P0.05);与CT组相比,TT组小鼠血清皮质酮浓度(P0.05)进一步升高。结论:产前应激进一步加剧慢性应激所致的成年子鼠学习记忆损伤,其机制可能与其升高成年子鼠血清皮质酮水平,促进APP和BACE1基因的表达,进而增加Aβ42的生成,最终引起海马CA3区神经元损伤有关。
【关键词】：产前应激 慢性应激 皮质酮 淀粉样蛋白 学习记忆
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 英文缩略词表6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-12
• 2 材料与方法12-39
• 2.1 主要仪器及其型号12-14
• 2.2 主要试剂及其批号14-16
• 2.3 主要溶液的配制16-19
• 2.4 实验动物、分组和实验方法19-39
• 2.4.1 亲代小鼠的饲养、繁殖19-20
• 2.4.2 母代小鼠的产前慢性应激方法20-21
• 2.4.3 雄性子代小鼠的基因鉴定21-24
• 2.4.4 雄性子代小鼠的饲养及其成年后的慢性应激方法24-25
• 2.4.5 学习记忆能力测试25
• 2.4.6 HE染色观察病理改变25-27
• 2.4.7 免疫组化27-28
• 2.4.8 Congo red染色法检测淀粉样斑块28-29
• 2.4.9 Western blot法测定海马组织APP、BACE1和Aβ42蛋白的表达量29-37
• 2.4.10 ELISA法测定血清皮质酮水平37-38
• 2.4.11 统计学分析38-39
• 3 结果39-47
• 3.1 产前慢性应激进一步加剧子代慢性应激所致的子鼠学习记忆能力损伤39-41
• 3.2 产前慢性应激进一步加剧子代慢性应激所致的子鼠海马CA3区神经元损伤41-42
• 3.3 产前慢性应激进一步加剧子代慢性应激所致的子鼠海马CA3区APP、BACE1和Aβ42表达42-43
• 3.4 产前慢性应激进一步加剧子代慢性应激所致的子鼠淀粉样斑块沉积43-45
• 3.5 产前慢性应激进一步加剧子代慢性应激所致的子鼠海马APP、BACE1和Aβ42表达45-46
• 3.6 产前慢性应激进一步加剧子代慢性应激所致的子鼠血清皮质酮水平升高46-47
• 4 讨论47-51
• 参考文献51-56
• 附录56-57
• 致谢57-58
• 综述58-72
• 参考文献65-72

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李亚;陈亚静;史建勋;张冠雄;;慢性应激对小鼠学习记忆功能影响及突触作用[J];中国公共卫生;2012年12期

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本文编号：555511