白细胞介素32与阿尔茨海默病关联性研究
发布时间:2017-08-10 02:29
本文关键词:白细胞介素32与阿尔茨海默病关联性研究
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【摘要】:【目的】通过用Aβ处理人胶质瘤细胞株U251细胞,观察IL-32在U251中表达情况,并通过检测TNF-α的表达量分析IL-32与TNF-α的关系,以期对阿尔茨海默病的炎症机制研究提供参考作用。 【方法】血清饥饿法处理U251细胞,用不同浓度Aβ42(0ug/ml、5ug/ml、10ug/ml、20ug/ml、30ug/ml,40ug/ml)刺激U251,MTS测存活率,选择半数存活率浓度作为最适浓度用于后续实验。用最适浓度Aβ处理U2510h、6h、12h及24h,提取各组细胞总RNA,逆转录成cDNA,利用Real-time PCR方法检测IL-32和TNF-α mRNA表达水平;提取各组细胞总蛋白,Western blot法检测IL-32和TNF-α蛋白表达量。 【结果】 Real-time PCR检测结果显示:IL-32mRNA表达水平及TNF-αmRNA表达水平均升高,差异具有统计学意义(P<0.01,vs control)。与TNF-α相比,各组IL-32mRNA表达量均比TNF-α高(P<0.01),且药物处理组IL-32变化较TNF-α更显著(P<0.01)。Western blot法检测结果显示,与正常组相比,30ug/ml浓度的Aβ作用于U251细胞6h、12h,24h时IL-32蛋白水平均有显著增高(6h:P<0.05,,12h和24h:P<0.01),TNF-α蛋白水平亦有显著上调趋势(6h:P<0.05,12h和24h:P<0.01)。与TNF-α相比,各组IL-32的蛋白表达量均较低。通过pearson相关性分析示,相同浓度不同时间Aβ处理的U251细胞中IL-32与TNF-αmRNA基因及蛋白表达水平均呈显著正相关(mRNA:r=0.965,P<0.001,蛋白质:r=0.946,P<0.001)。 【结论】1. IL-32可能与阿尔茨海默病免疫炎症发病机制相关;2.在一定时期内,阿尔茨海默病患者病程越长,其脑内IL-32表达量越多;3.IL-32表达量与TNF-α的表达量有显著相关性,IL-32可能作为一种前炎症因子诱导TNF-α的产生,且IL-32部分依赖TNF-α的表达;4.IL-32蛋白在脑内可能只表达某种亚型。
【关键词】:胶质瘤细胞 白细胞介素32 肿瘤坏死因子α β淀粉样蛋白
【学位授予单位】:福建医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R749.16
【目录】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-7
- 缩略词表7-8
- 第一章 引言8-10
- 第二章 材料和方法10-23
- 第三章 实验结果23-33
- 第四章 讨论33-37
- 第五章 结论37-38
- 参考文献38-41
- 致谢41-42
- 综述42-52
- 参考文献48-52
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 孔繁军;韩晓涛;张茁;;β-淀粉样蛋白与阿尔茨海默病神经元退变的研究现状[J];神经疾病与精神卫生;2007年06期
本文编号:648449
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