SIRT1介导硫化氢抗糖尿病大鼠认知功能障碍

发布时间：2017-08-10 16:15

  本文关键词：SIRT1介导硫化氢抗糖尿病大鼠认知功能障碍

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【摘要】：【研究背景与目的】糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一种慢性代谢性疾病,可累及中枢神经系统,引起认知功能障碍。硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)作为一种新型气体性神经调质,我们课题组前期证明其可拮抗糖尿病大鼠的认知功能障碍,但具体机制尚不明确。研究表明,沉默信息调节因子1(Silent information regulator 1,SIRT1)在细胞存亡、神经生长、突触生成及突触可塑性等方面起关键作用,并参与学习记忆的形成。我们既往发现,H2S可上调糖尿病大鼠海马组织SIRT1的表达,由此推测SIRT1可介导H2S的抗糖尿病性认知功能障碍作用。本课题将从海马损伤和认知行为学两个方面探讨SIRT1抑制剂Sirtinol对H2S抗糖尿病大鼠认知功能障碍作用的阻断效应,以明确SIRT1对H2S抗糖尿病性认知功能障碍的介导作用。【方法】Y迷宫、新物体识别和Morris水迷宫检测大鼠学习记忆和认知能力;Western blot检测大鼠海马组织中内质网应激分子标记蛋白即糖调节蛋白(Glucose-regulated protein 78 k D,GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)及Cleaved-caspase-12的表达;Western blot检测促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2及突触蛋白(Synapsin1,SYN-1)的表达;Tunel(Terminal-deoxynucleotidyl transferase-mediated d UTP nick-end labeling)法分析大鼠海马神经元的凋亡情况;酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunesorbent assay,Elisa)检测大鼠海马组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)及谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量;氮蓝四唑(NBT)法检测大鼠海马组织SOD的活性。【结果】1.SIRT1特异性阻断剂Sirtinol可抑制H2S对糖尿病大鼠认知功能的改善作用Y迷宫实验结果显示,Sirtinol(SIRT1特异性阻断剂)(10 nmol)可减少Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠自主交替率的增加作用。新物体识别实验显示,Sirtinol(10 nmol)可降低Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠新物体识别指数的升高作用。水迷宫实验获得性训练期第5天结果示,Sirtinol(10 nmol)可取消Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠寻找平台的潜伏期的缩短作用。水迷宫探查实验发现,Sirtinol(10 nmol)可克服Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠穿越平台次数、目标象限时间比及中环游走时间比的增加作用。以上结果表明SIRT1抑制剂Sirtinol可逆转H2S对糖尿病大鼠学习记忆的改善作用。2.SIRT1特异性阻断剂Sirtinol可取消H2S对糖尿病大鼠海马损伤的拮抗作用Western blot结果显示Sirtinol(10 nmol)减弱Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠海马内质网应激分子标记蛋白GRP78、CHOP及Cleaved-caspase-12表达的下调作用,表明Sirtinol可逆转H2S对糖尿病大鼠海马内质网应激的拮抗作用。Elisa检测大鼠海马组织MDA和GSH含量结果显示,Sirtinol(10nmol)可抑制Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠海马MDA含量的降低作用和对GSH含量的升高作用;NBT法检测大鼠海马组织SOD的活性结果示,Sirtinol(10 nmol)可抑制Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠海马SOD活性的增强作用;结果表明Sirtinol可逆转H2S对糖尿病大鼠海马氧化应激损伤的拮抗作用。Tunel法分析结果示,Sirtinol(10 nmol)能明显逆转Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠海马Tunel阳性细胞数量的减少作用;Western blot检测大鼠海马Bax及Bcl-2的表达,结果显示Sirtinol可拮抗H2S对糖尿病大鼠海马Bax表达的下调作用及Bcl-2表达的上调作用。上述结果表明Sirtinol可逆转H2S对糖尿病大鼠海马凋亡的拮抗作用。Western blot检测大鼠海马Synapsin-1表达结果显示,Sirtinol(10nmol)逆转了Na HS(100mmol/kg/d,30 d)对糖尿病大鼠海马Synapsin-1表达的上调作用,表明Sirtinol可逆转H2S对糖尿病大鼠海马突触形成障碍的改善作用。【结论】SIRT1介导H2S抗糖尿病大鼠认知功能障碍。
【关键词】：硫化氢 SIRT1 糖尿病 认知功能 海马损伤
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R749.2
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-13
• 缩略词13-14
• 第1章 绪论14-18
• 第2章 材料与方法18-28
• 2.1. 主要试剂和仪器18-20
• 2.2. 试剂和药品的配制20-21
• 2.3. 实验方法21-26
• 2.4. 统计方法26-28
• 第3章 结果28-38
• 3.1. SIRT1对H_2S改善糖尿病大鼠认知功能的介导作用28-31
• 3.2. SIRT1对H_2S拮抗糖尿病大鼠海马损伤的介导作用31-38
• 3.2.1 Sirtinol逆转H_2S抑制糖尿病大鼠海马内质网应激31-32
• 3.2.2 Sirtinol逆转H_2S抗糖尿病大鼠海马氧化应激损伤32-34
• 3.2.3 Sirtinol逆转H_2S抗糖尿病大鼠海马细胞凋亡的作用34-35
• 3.2.4 Sirtinol抑制H_2S上调糖尿病大鼠海马Synapsin-1 的表达35-38
• 第4章 讨论38-42
• 第5章 结论42-44
• 参考文献44-52
• 文献综述52-60
• 参考文献55-60
• 硕士期间发表的论文60-62
• 致谢62-63

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1 ;糖尿病[J];国外科技资料目录.医药卫生;1998年10期

2 ;糖尿病[J];国外科技资料目录.医药卫生;1998年01期

3 仝小林;;糖尿病9问(上)[J];药物与人;2007年03期

4 王秋月,刘国良;生活习惯与糖尿病[J];医师进修杂志;2000年09期

5 陈广耀;抗糖尿病中药开发前景展望[J];中国新药杂志;2000年07期

6 太田康晴,庄祥云;糖尿病[J];日本医学介绍;2000年08期

7 ;糖尿病[J];国外科技资料目录.医药卫生;2000年06期

8 ;糖尿病[J];国外科技资料目录.医药卫生;2000年08期

9 ;糖尿病[J];国外科技资料目录.医药卫生;2000年11期

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5 石凤英;王尧;;灵芝对糖尿病大鼠肾脏形态学及微量白蛋白尿的作用[A];中国康复医学会第三次康复治疗学术大会论文汇编[C];2002年

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8 李筱荣;李艳;刘巨平;袁佳琴;;糖尿病大鼠血—视网膜屏障损伤的实验研究[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年

9 杨毅;陈江华;王晶晶;秦岭;;雷帕霉素对糖尿病大鼠肾脏组织增殖和肥大的抑制作用[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年

10 祁少海;刘坡;舒斌;谢举临;徐盈斌;黄勇;毛任翔;刘旭盛;;不同深度糖尿病大鼠烫伤模型的制备[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年

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2 本报记者 王乐羊;中西医结合防治糖尿病大有可为[N];中国中医药报;2002年

3 北京协和医院 梁晓春;对中医治糖尿病并发症研究的思考[N];中国中医药报;2011年

4 刘燕玲;肥胖是糖尿病的源头[N];健康报;2006年

5 仝小林;糖尿病慢性并发症论治[N];中国中医药报;2003年

6 汪敏;糖尿病皮肤易损元凶找到[N];卫生与生活报;2003年

7 林兰;中西医结合治疗糖尿病的前景[N];中国中医药报;2007年

8 北京协和医院中医科主任 梁晓春;糖尿病周围神经病变的中西医治疗进展[N];中国医药报;2009年

9 本报记者 刘艳芳;糖尿病干预不能忽视抗氧化[N];中国食品报;2012年

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本文编号：651666