NT-3高表达促进神经干细胞向胆碱能神经元分化

发布时间：2017-09-02 03:38

  本文关键词：NT-3高表达促进神经干细胞向胆碱能神经元分化

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【摘要】：目的体外研究神经营养因子3(neurotrophin-3,NT-3)基因转染神经干细胞(neural stem cells,NSCs)后对其向胆碱能神经元分化的影响,并探讨其机制。方法体外分离培养新生小鼠脑源NSCs,免疫荧光细胞化学法对其进行鉴定;将NSCs分为NSCs组(不作任何处理的NSCs)、GFP-NSCs组(转染GFP的NSCs)、NT-3-NSCs组(转染NT-3的NSCs),免疫荧光细胞化学法和ELISA法检测各组NSCs中NT-3的表达;免疫荧光细胞化学法和RT-PCR法检测各组NSCs向胆碱能神经元分化的能力;乙酰胆碱检测试剂盒检测乙酰胆碱分泌情况;RT-PCR法检测Notch信号通路相关靶基因Hes1、Mash 1和Neurogenin 1(Ngn1)表达情况。结果免疫荧光细胞化学法结果显示,NSCs表达其特异性标志蛋白Nestin和Sox2,与NSCs组和GFP-NSCs组相比,NT-3-NSCs组能够分化为更多的胆碱能神经元(P0.01),分化的胆碱能神经元可分泌乙酰胆碱(P0.01),且能够减少Notch通路靶基因Hes 1 mRNA的表达,增加Mash1、Ngn 1 mRNA的表达(P0.05)。结论 NT-3高表达可促进NSCs分化为更多的胆碱能神经元,其机制可能与抑制Notch信号通路有关。
【作者单位】： 辽宁中医药大学药学院药理学教研室;
【关键词】： 神经干细胞 阿尔茨海默病 神经营养因子 胆碱能神经元 分化 Notch信号通路
【基金】：国家自然科学基金面上项目(No 81173580)
【分类号】：R749.16
【正文快照】： R977.6和Sox2,与NSCs组和GFP-NSCs组相比,NT-3-NSCs组能够分化为更多的胆碱能神经元(P0.01),分化的胆碱能神经元可分泌乙酰胆碱(P0.01),且能够减少Notch通路靶基因Hes 1 mRNA的表达,增加Mash1、Ngn 1 mRNA的表达(P0.05)。结论NT-3高表达可促进NSCs分化为更多的胆碱能神经元

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