雷公藤内酯醇对大鼠海马内注射β-淀粉样蛋白后drebrin和cofilin表达的影响

发布时间：2017-09-07 00:19

  本文关键词：雷公藤内酯醇对大鼠海马内注射β-淀粉样蛋白后drebrin和cofilin表达的影响

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【摘要】：目的： 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）的发病机制至今仍未完全明了，近年来，AD的免疫炎症学说受到了越来越多的关注。雷公藤内酯醇是我国独创的一种具有抗炎、免疫抑制作用的药物。大量的研究表明，雷公藤内酯醇具有明确的神经保护作用。我们的前期工作也显示，雷公藤内酯醇可以缓解AD模型大鼠海马神经元树突棘的退化。树突棘的主要细胞骨架成分是肌动蛋白，树突棘形态的改变是通过树突棘内肌动蛋白的重排而实现的。肌动蛋白的重排主要受肌动蛋白结合蛋白的调节，发育调节脑蛋白（developmentally regulated brainprotein，drebrin）和丝切蛋白（cofilin）是调节树突棘形态的两个主要的肌动蛋白结合蛋白。本实验观察雷公藤内酯醇对AD模型大鼠海马神经元drebrin和cofilin表达的影响，从树突棘结构重塑的角度来探讨雷公藤内酯醇对AD的作用机制。 方法： 1、45只SD雄性大鼠等分成对照组、模型组、用药组。大鼠右侧海马内一次性注射凝聚态Aβ1－40设为模型组，大鼠右侧海马内注射等量生理盐水设为对照组，用药组大鼠在右侧海马注射凝聚态Aβ1－40后腹腔注射雷公藤内酯醇0.4mg kg-1，共15d。 2、Golgi染色用于检测各组大鼠海马神经元树突棘密度的变化。 3、免疫组织化学染色用于检测各组大鼠海马神经元drebrin和cofilin表达的变化。 4、RT-PCR用于检测各组大鼠海马神经元drebrin mRNA和cofilin mRNA表达的变化。 结果： 1、Golgi染色结果显示，对照组大鼠海马神经元树突棘数量多而密集，模型组大鼠海马神经元树突棘密度明显低于对照组（P＜0.01），用药组大鼠海马神经元树突棘密度明显高于模型组（P＜0.05）。 2、drebrin免疫组织化学染色结果显示，和对照组相比，模型组大鼠海马drebrin免疫反应阳性细胞数量明显减少（P＜0.01），平均光密度明显降低（P＜0.01）；用药组大鼠海马drebrin免疫反应阳性细胞数量较模型组明显增多（P＜0.05），，用药组大鼠海马drebrin免疫反应阳性细胞平均光密度较模型组略有升高，但无统计学意义（P＞0.05）。 3、cofilin免疫组织化学染色结果显示，与对照组比较，模型组大鼠海马cofilin免疫反应阳性细胞数量明显增多（P＜0.01），平均光密度明显升高（P＜0.01）；与模型组比较，用药组大鼠海马cofilin免疫反应阳性细胞数量明显减少（P＜0.05），平均光密度明显下降（P＜0.01）。 4、drebrin RT-PCR检测显示，模型组大鼠海马drebrin mRNA的表达明显低于对照组（P＜0.01）；用药组大鼠海马drebrin mRNA的表达明显高于模型组（P0.05）。 5、cofilin RT-PCR检测显示，模型组大鼠海马cofilin mRNA的表达明显高于对照组（P＜0.01）；用药组大鼠海马cofilin mRNA的表达明显低于模型组（P0.01） 结论： 雷公藤内酯醇能增加AD模型大鼠海马神经元drebrin的表达，抑制AD模型大鼠海马神经元cofilin的表达。
【关键词】：雷公藤内酯醇 阿尔茨海默病 发育调节脑蛋白 丝切蛋白
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料和方法12-20
• 2.1 实验材料12-15
• 2.1.1 实验动物12
• 2.1.2 主要试剂和药品12-13
• 2.1.3 主要仪器设备13-14
• 2.1.4 主要试剂和溶液的配制14-15
• 2.2 实验方法15-20
• 2.2.1 Aβ_(1-40)的孵育15
• 2.2.2 动物分组与药物干预15
• 2.2.3 Golgi 染色15-16
• 2.2.4 免疫组织化学染色16
• 2.2.5 RNA 的提取与鉴定16-17
• 2.2.6 RT-PCR 测定 Drebrin 和 Cofilin 表达水平17-19
• 2.2.7 统计学分析19-20
• 第3章 结果20-26
• 3.1 Golgi 染色结果20-21
• 3.2 drebrin 免疫组织化学染色结果21-22
• 3.3 cofilin 免疫组织化学染色结果22-23
• 3.4 drebrin mRNA 检测23-24
• 3.5 cofilin mRNA 检测24-26
• 第4章 讨论26-29
• 4.1 海马内注射 Aβ_(1-40) 建立 AD 模型26
• 4.2 Aβ对树突棘的损害作用26-27
• 4.3 AD 树突棘内肌动蛋白调节机制受损27-28
• 4.4 雷公藤内酯醇对 AD 模型大鼠海马神经元 drebrin 和 cofilin 表达的影响28-29
• 第5章 结论29-30
• 致谢30-31
• 参考文献31-34
• 附图34-39
• 攻读学位期间的研究成果39-40
• 综述40-46
• 参考文献44-46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 周琳娜;刘娟;杨朝辉;刘胜洪;何学斌;沈凯;薛存宽;;雌激素替代治疗对大鼠小脑树突棘素表达的影响[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2009年05期

2 张晓光;薛张纲;;记忆提取对小鼠树突棘的形态学影响[J];中国临床医学;2012年02期

3 吴兰香;孙长凯;张玉梅;范明;徐静;马辉;张健;;银杏叶提取物神经保护作用中Snk-SPAR途径机制探讨[J];神经解剖学杂志;2007年02期

4 柴继侠;李瑞锡;彭裕文;;Drebrin在神经元树突棘形成和重塑中的作用[J];神经解剖学杂志;2009年02期

5 战丽彬;宫晓洋;刘莉;稽征鸿;隋华;;脾阴虚痴呆大鼠不同脑区Snk-SPAR路径及滋补脾阴方药调控作用研究[J];世界科学技术(中医药现代化);2011年05期

6 顾明,周慧芳,薛冰,牛东滨,何其华,王晓民;雷公藤单体T_(10)对Aβ1-42所致PC12细胞凋亡的抑制作用[J];生理学报;2004年01期

7 赵微;苏玉虹;巴彩凤;朱宝芹;;Cofilin蛋白功能及活性调节[J];中国生物化学与分子生物学报;2007年09期

8 宋春未;戴雪伶;姜招峰;;阿尔茨海默病实验动物模型研究进展[J];生物学杂志;2013年05期

9 贾丽洁;罗艳;张富军;于布为;;Drebrin对突触可塑性的影响以及相关认知功能障碍的研究进展[J];中国药理学通报;2010年08期

10 ;Effects of tanshinone on neuropathological changes induced by amyloid β-peptide(1-40)injection in rat hippocampus[J];Acta Pharmacologica Sinica;2004年07期

本文编号：806302