GAD67-GFP小鼠精神分裂症后海马GABA能神经元的变化及与海马神经发生的关系

发布时间：2017-09-16 16:33

  本文关键词：GAD67-GFP小鼠精神分裂症后海马GABA能神经元的变化及与海马神经发生的关系

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【摘要】：目的明确GAD67-GFP小鼠精神分裂症（SP）发生后GABA能神经元在海马的表达；阐明GABA能神经元与海马齿状回颗粒细胞层新生颗粒细胞的共存模式，为SP的发病机制的研究提供新的实验和理论依据。 方法应用NMDA受体拮抗剂MK-801，制备精神分裂症动物模型。将48只出生6周的GAD67-GFP基因敲入小鼠随机分为实验组和对照组，各24只。实验组腹腔注射MK-801，0.6mg/kg/d，对照组等时等剂量腹腔注射生理盐水，连续注射14d。对两组动物分别进行BrdU标记，断头处理：（1）免疫荧光染色，，观察海马GABA能神经元的表达以及与BrdU标记的新生颗粒细胞的共存模式；（2）尼氏染色观察海马齿状回颗粒细胞层神经元的变化（3）流式细胞技术：观察海马神经细胞的增殖情况。（4）利用Western-blot技术，检测海马GABA能神经元蛋白表达水平的改变。（5）利用RT-PCR技术，检测海马GAD67mRNA表达水平的改变。 结果（1）GABA能神经元在海马的变化：①免疫荧光染色结果：实验组与对照组相比海马齿状回GABA能神经元阳性细胞数目未见明显变化(P＞0.05)；未发现GABA能神经元与新生颗粒细胞的共存。②Western-blot结果：实验组与对照组比较，GABAa蛋白及GFP蛋白均未有明显变化(P＞0.05)；③RT-PCR结果：实验组小鼠海马GAD67mRNA的表达量较对照组显著下降（P＜0.05）。（2）海马齿状回神经发生的变化：①尼氏染色结果：对实验组及对照组齿状回区行光密度分析，未发现明显改变(P0.05)，正常组小鼠海马齿状回区尼氏小体排列整齐，未发现其深染，紊乱，及异常增多;实验组小鼠齿状回区尼氏小体排列紊乱，断裂，在齿状回颗粒细胞下层可见一明显深染的尼氏小体聚集带。②免疫荧光染色结果：实验组与对照组相比，海马齿状回颗粒细胞层新生神经细胞的数目显著下降（P＜0.05）③流式细胞结果：实验组小鼠较对照组小鼠海马神经细胞的增殖显著下降(P＜0.05)。 结论（1）GAD67-GFP小鼠精神分裂症后海马齿状回GABA能神经元阳性细胞数目未见明显改变。（2）GAD67-GFP小鼠精神分裂症后可引起海马齿状回神经细胞增殖的降低，及齿状回颗粒细胞层尼氏小体排列表达的变化。（3）GAD67-GFP小鼠精神分裂症后，在蛋白水平上，海马GABAa及GFP蛋白的表达未见明显变化。（4）GAD67-GFP小鼠精神分裂症后，在mRNA水平上，海马GAD67mRNA的表达降低。
【关键词】：精神分裂症 GABA 海马神经发生 GAD67-GFP小鼠
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R749.3
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 中英文缩略词表8-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-23
• 结果23-25
• 讨论25-28
• 结论28-29
• 附图29-39
• 参考文献39-42
• 综述42-52
• 综述参考文献47-52
• 致谢52-53
• 攻读学位期间发表的学术论文53-54
• 个人简历54

【参考文献】

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1 张义伟;肖培伦;吕s

本文编号：864182