阿尔兹海默病细胞模型中DNA去甲基化对Nrf2表达及活性的影响

发布时间：2017-10-06 01:46

  本文关键词：阿尔兹海默病细胞模型中DNA去甲基化对Nrf2表达及活性的影响

  更多相关文章： 阿尔兹海默病 DNA去甲基化 核因子E2相关因子2 醌氧化还原酶 氧化应激 细胞模型

【摘要】：核因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)是重要的抗氧化应激核转录因子。越来越多的研究证据表明氧化应激在阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发病过程中起着关键作用。一些关于AD的动物和临床研究发现,AD脑内Nrf2的表达降低,但其潜在机制尚不明确。本研究以稳定转染Swedish家族突变的人APP695的小鼠神经母细胞瘤N2a/APPswe细胞作为AD的细胞模型,予以DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferase,Dnmts)抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza)处理,采用亚硫酸氢盐测序聚合酶链反应法(Bisulfite-sequencing PCR,BSP)检测5-Aza处理前后细胞中Nrf2基因启动子区DNA的甲基化水平;Q-PCR检测细胞中Nrf2,NQO1的mRNA表达水平,Western blot检测细胞中Dnmts,总Nrf2,核内Nrf2,NQO1的蛋白质表达水平;免疫荧光法检测5-Aza处理前后Nrf2在细胞内的分布情况。结果显示:(1).5-Aza处理后能有效上调N2a/APPswe细胞中Nrf2的mRNA和蛋白水平;(2).5μM的5-Aza处理后N2a/APPswe细胞中Nrf2启动子区DNA发生去甲基化;(3).5-Aza能够抑制N2a/APPswe细胞中Dnmts的表达;(4).5-Aza能促进Nrf2的核转位,上调Nrf2下游抗氧化蛋白NQO1的表达。上述结果表明,在AD细胞模型中,DNA去甲基化能够上调Nrf2的表达,促进Nrf2的核转位,提高其下游抗氧化蛋白的表达。本研究首次从DNA甲基化角度阐释了Nrf2在AD中的抗氧化应激作用,同时为Nrf2为基础的AD表观遗传学治疗途径提供了一定的理论基础。
【关键词】：阿尔兹海默病 DNA去甲基化 核因子E2相关因子2 醌氧化还原酶 氧化应激 细胞模型
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 第一章 DNA去甲基化对阿尔兹海默病细胞模型中Nrf2 表达的影响11-29
• 1 材料与方法11-24
• 2 结果24-27
• 3 讨论27-28
• 4 小结28-29
• 第二章 DNA去甲基化对阿尔兹海默病细胞模型中Nrf2 活性的影响29-35
• 1 材料与方法29-32
• 2 结果32-33
• 3 讨论33-34
• 4 小结34-35
• 全文总结35-36
• 参考文献36-39
• 文献综述39-51
• 参考文献47-51
• 致谢51-52
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录52

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本文编号：980033