miR-9-5p靶向抑制Ambra1促进舌癌细胞增殖

发布时间：2018-03-17 11:10

  本文选题：miR--p　切入点：自噬/苄氯素调节因子　出处：《中国生物化学与分子生物学报》2017年07期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：miRNAs在肿瘤中异常表达,且与肿瘤的发生发展密切相关。目前发现,miR-9-5p在肿瘤中可能发挥原癌或抑癌效应,功能尚未完全阐述清楚。本文拟探讨miR-9-5p在舌癌中的作用。前期研究中收集10例舌癌组织及配对的癌旁组织,实时荧光定量PCR技术检测后发现,miR-9-5p在舌癌组织中的表达量显著高于癌旁组织,且其在舌癌细胞中的表达量也明显高于正常舌上皮细胞。此外,在舌癌细胞Tca8113中过表达miR-9-5p显著增加细胞的增殖能力。生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验证实,miR-9-5p可直接结合在自噬/苄氯素1调节因子1(activating molecule in beclin1-regulated autophagy,Ambra1)的3'-UTR区域,靶向抑制Ambra1表达。Western印迹结果证实过表达miR-9-5p降低Ambra1的表达,反之亦然。Ambra1在舌癌细胞中的表达量显著低于正常舌上皮细胞。Brd U实验证实在舌癌细胞SCC-25中过表达Ambra1可显著抑制其增殖能力;相反,使用siRNA技术沉默Ambra1能够显著促进Tca8113细胞的增殖。在干预miR-9-5p的细胞中同时干预Ambra1的表达,结果发现Ambra1可显著逆转miR-9-5p对舌癌细胞增殖的促进作用。总之,miR-9-5p在舌癌中可能发挥原癌基因样作用,通过直接靶向抑制Ambra1表达进而促进舌癌细胞发生增殖。
[Abstract]:The abnormal expression of miRNAs in tumor is closely related to the occurrence and development of tumor. At present, it has been found that miR-9-5p may play a role of proto or tumor suppressor in tumor. The role of miR-9-5p in tongue cancer was not fully elucidated. Ten cases of tongue cancer tissues and matched adjacent tissues were collected in the previous study. The expression of miR-9-5p in tongue cancer tissues was significantly higher than that in paracancerous tissues, and the expression of miR-9-5p in tongue cancer cells was significantly higher than that in normal tongue epithelial cells. Overexpression of miR-9-5p in Tca8113 of tongue cancer cells significantly increased cell proliferation. Bioinformatics prediction and double luciferase reporter gene experiments confirmed that miR-9-5p could directly bind to the 3H-UTR region of autophagy / benzyl chloride 1 regulatory factor 1 activating molecule in beclin1-regulated autophagy Ambra1. Western blotting showed that overexpression of miR-9-5p reduced the expression of Ambra1. The expression of. Ambra1 in tongue cancer cells was significantly lower than that in normal tongue epithelial cells. Brd U assay showed that overexpression of Ambra1 in SCC-25 of tongue cancer cells significantly inhibited the proliferation of tongue cancer cells. Silencing Ambra1 with siRNA technique could significantly promote the proliferation of Tca8113 cells. The expression of Ambra1 was also inhibited in the cells that interfered with miR-9-5p. The results showed that Ambra1 could significantly reverse the effect of miR-9-5p on the proliferation of tongue cancer cells. In conclusion, miR-9-5p may play a proto-oncogene-like role in tongue cancer, and promote the proliferation of tongue cancer cells by directly targeting the Ambra1 expression.
【作者单位】： 广州医科大学附属肿瘤医院头颈科;
【分类号】：R739.86

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