3与地塞米松联合培养对兔牙髓干细胞成骨分化的影响

  本文关键词：TGF-β_3与地塞米松联合培养对兔牙髓干细胞成骨分化的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

《新疆医科大学》 2016年

TGF-β_3与地塞米松联合培养对兔牙髓干细胞成骨分化的影响

帕尔哈提·阿布肚热合曼  

【摘要】：目的:观察转化生长因子β_3(Transforming growth factorβ_3,TGF-β_3)与地塞米松(Dexamethasone,DEX)兔牙髓干细胞(Dental pulp cells,DPSCs)的成骨诱导影响,探讨二者联合诱导DPSCs向成骨分化的可能性和适当条件,使兔DPSCs向成骨诱导得以优化,从而为临床治疗颌面部骨缺损提供实验基础。方法:酶解组织块法获得兔DPSCs进行培养,用光学显微镜观察细胞形态,及鉴定DPSCs多项分化能力。加入不同浓度的TGF-β_3(0,10,25,50,100ng/ml)和DEX(10nM,100nM,1μM),分别在作用3天后MTT法检测细胞的增殖。实验分非诱导组(A)(完全培养基),DEX诱导组(B)(100nmol/L DEX),TGF-β_3诱导组(C)(加入100ng/mlTGF-β_3),DEX与TGF-β_3诱导组(D)(加入DEX,TGF-β_3);培养14天茜素红(Alizarin red S)检测细胞外基质矿化程度,免疫细胞化检测骨钙素(OCN),RUNT相关转录因子(RUNX-2)蛋白的表达,荧光定量PCR检测骨钙素(OCN),碱性磷酸酶(ALP),RUNX-2基因的表达。结果:10-100nM DEX对兔DPSCs有增殖作用,100-1000nM DEX抑制细胞的增殖,体外培养的兔DPSCs在TGF-β_3与DEX作用下,茜素红染色形成矿化结节,骨钙素,runx-2染色呈阳性。荧光定量PCR(real time quantative PCR)显示:与对照组相比,实验组(B,C,D)成骨相关基因表达水平均升高,各实验组成骨相关转录因子表达水平差异有统计学意义(P0.05)。结论:TGF-β_3对兔DPSCs无增殖作用,而促进DPSCs分化。DEX双向调节兔牙髓干细胞增殖,分化。TGF-β_3与DEX联合诱导牙髓干细胞较单独诱导成骨作用更好,是理想的成骨诱导组合。

【关键词】：
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R783.1
【目录】：

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