熊果酸对成牙骨质细胞增殖及矿化功能的影响

发布时间：2017-04-05 16:13

  本文关键词：熊果酸对成牙骨质细胞增殖及矿化功能的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:正畸炎性牙根吸收是正畸过程中由机械力因素或生物因素引起牙根组织发生不同程度的吸收,表现为牙根表面出现凹陷、牙根变短、甚至牙齿松动脱落,是正畸常见的并发症之一[1]。牙根吸收的修复主要依赖于成牙骨质细胞的作用,激活的成牙骨质细胞形成前期牙骨质,后经矿化为成熟牙骨质。目前临床上尚无有效标准的治疗牙根吸收的方法,因此如何促进成牙骨质细胞的功能成为修复正畸炎性牙根吸收的方法之一。熊果酸(ursolic acid,UA)为一种五环三萜类化合物,在植物界分布极为广泛,如希腊鼠尾草、夹竹桃[2],毒性低不良反应少,具有抗肝炎,抗肿瘤,抗菌抗病毒,降血糖,增强免疫力等效果[3-8];另有研究显示熊果酸在成骨和破骨方面,可抑制骨密度流失[9],促进骨形成[10],但对成牙骨质细胞的影响尚不清楚,因此本实验将观察熊果酸对成牙骨质细胞的增殖及矿化功能是否有促进作用?探讨熊果酸对治疗牙根吸收修复方面的可能性。方法:1.培养成牙骨质细胞系OCCM-30,并筛选出熊果酸作用于成牙骨质细胞的适宜浓度范围。2.为检测熊果酸对成牙骨质细胞增殖的影响,使用适宜浓度熊果酸作用于成牙骨质细胞,cck-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡。3.为检测熊果酸对成牙骨质细胞矿化功能影响,使用微量酶标法检测碱性磷酸酶活性,茜素红染色法定量及定性检测矿化结节量。结果:1.熊果酸对成牙骨质细胞促进的适宜浓度为2.5uM。2.熊果酸组(2.5uM)相比于对照组,细胞增殖率和细胞周期增殖指数升高,早期凋亡率降低。3.熊果酸组(2.5uM)相比于对照组,碱性磷酸酶活性增高,矿化结节量上调。结论:熊果酸对成牙骨质细胞有促进成牙骨质作用。2.5uM浓度熊果酸可促进成牙骨质细胞增殖,细胞周期中处于G1期细胞百分比降低,抑制细胞早期凋亡,增强碱性磷酸酶活性,促进矿化结节的形成。随着研究的深入熊果酸有望成为临床上治疗牙根吸收的药物。
【关键词】：熊果酸 鼠成牙骨质细胞OCCM-30 牙根吸收与修复
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R783.5
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩略词表10-11
• 第1章 绪论11-16
• 1.1 研究背景11-15
• 1.1.1 牙骨质再生在牙周组织修复的研究进展11-12
• 1.1.2 成牙骨质细胞研究进展12-13
• 1.1.3 熊果酸在骨代谢方面研究进展13-15
• 1.2 实验提出与设计15-16
• 第2章 实验16-31
• 2.1 实验材料16-17
• 2.1.1 主要仪器16
• 2.1.2 细胞16
• 2.1.3 试剂与耗材16-17
• 2.2 实验方法17-21
• 2.2.1 冻存细胞的复苏与培养17-18
• 2.2.2 成牙骨质细胞的传代18
• 2.2.3 成牙骨质细胞的冻存18
• 2.2.4 绘制细胞生长曲线18
• 2.2.5 成牙骨质细胞矿化诱导18-19
• 2.2.6 cck-8 法测定熊果酸对细胞增殖的影响19
• 2.2.7 流式细胞仪检测熊果酸对细胞周期的影响19
• 2.2.8 流式细胞仪检测熊果酸对细胞凋亡的影响19-20
• 2.2.9 微量酶标法检测熊果酸对碱性磷酸酶活性的影响20-21
• 2.2.10 茜素红染色法测定熊果酸对矿化结节量的影响21
• 2.2.11 数据处理21
• 2.3 结果21-31
• 2.3.1 成牙骨质细胞形态学观察21-22
• 2.3.2 成牙骨质细胞的生长曲线22-23
• 2.3.3 成牙骨质细胞矿化诱导23-25
• 2.3.4 熊果酸对成牙骨质细胞增殖的影响25-26
• 2.3.5 熊果酸对成牙骨质细胞周期的影响26-27
• 2.3.6 熊果酸对成牙骨质细胞凋亡的影响27-28
• 2.3.7 熊果酸对成牙骨质细胞碱性磷酸酶表达的影响28-29
• 2.3.8 熊果酸对成牙骨质细胞体外矿化功能的影响29-31
• 第3章 讨论31-33
• 第4章 结论33-34
• 参考文献34-40
• 作者简介40-41
• 致谢41-42

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本文编号：287298