可注射型壳聚糖温敏凝胶负载富血小板血浆和骨髓基质细胞促进牙周再生的研究

发布时间：2020-11-21 15:02

　　 目的：制备壳聚糖温敏凝胶及富含血小板血浆(PRP),将二者以不同比率共混后观察其微观结构；观察壳聚糖温敏凝胶/PRP共混物的浸提液对犬骨髓基质细胞(BMSCs)增殖、分化的作用。 方法：1、制备壳聚糖凝胶,从全血中提取PRP并对其进行血小板计数。2、将壳聚糖温敏凝胶及PRP按不同体积比共混后分为5组：A组,单纯壳聚糖温敏凝胶；B组,壳聚糖温敏凝胶：PRP=2∶1；C组,壳聚糖温敏凝胶：PRP=1∶1；D组,壳聚糖温敏凝胶：PRP=1∶2；E组,单纯PRP。将各组实验材料冷冻干燥后观察其大体及微观结构。3、根据以上分组制备壳聚糖温敏凝胶/PRP共混物的浸提液。4、体外分离培养犬BMSCs,通过MTT法及碱性磷酸酶试剂盒检测以上各组浸提液对第3代犬BMSCs增殖、分化的影响。 结果：1、壳聚糖/p-GP溶液在37℃孵箱内8～10min形成凝胶；对本方法制备的PRP进行血小板计数,其浓度约为浓缩前的8倍。2、随着加入PRP比率的增大,壳聚糖温敏凝胶的孔径亦逐渐增大：A组为50umm左右；B组为30～60um；C组为100～200um；D组为200～300um；E组为200～500um。3、成功地分离、培养出犬BMSCs,体外生长良好,培养三代后的犬BMSCs生长更趋活跃。B,C,D,E组浸提液与A组比较均可促进BMSCs的增殖及碱性磷酸酶水平的表达。 结论：PRP可以增大壳聚糖温敏凝胶的孔径；C组和D组的孔径已达到较为理想的组织工程支架材料的要求。壳聚糖温敏凝胶共混PRP后使PRP获得缓释功能,进而促进犬BMSCs增殖和分化,壳聚糖温敏凝胶/PRP共混复合物有望成为促进牙周组织再生的生物支架材料。
【学位单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2012
【中图分类】：R780.2
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一部分 壳聚糖温敏凝胶的合成及富含血小板血浆的制备
    材料和方法
    结果
    讨论
第二部分 壳聚糖温敏凝胶/PRP共混物的结构观察
    材料和方法
    结果
    讨论
第三部分 壳聚糖温敏凝胶负载PRP后对BMSCs作用
    材料和方法
    结果
    讨论
全文总结
参考文献
综述
    综述的参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢

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本文编号：2893181