Fat-1对人口腔鳞癌细胞影响的研究
发布时间：2020-12-10 16:05
近年来,n-3多不饱和脂肪酸已成为研究的热门课题,人们认识到它与人类的生命和健康关系密切。但n-3多不饱和脂肪酸在动物体内不能合成,只能从食物中补充。Fat-1基因的发现改变了这一现状,它可以将多不饱和脂肪酸从n-6形式转化为n-3形式,从而改变细胞中n-6/n-3 PUFAs的比例。口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma）是颌面部常见的肿瘤之一,其发病率高,生存率低,严重危害人类健康。传统的治疗方法包括手术、放化疗并不能明显提高患者的生存率。Fat-1基因的出现为口腔鳞癌的基因治疗提供了新的方向。本研究中,我们首先利用生物信息学工具及多条重叠引物PCR拼接的策略,拼接了Fat-1编码基因,然后构建真核表达载体pcDNA3.1-Fat1,对口腔鳞癌细胞株Tca8113进行稳定转染和对细胞中脂肪酸含量进行检测,发现Fat-1基因能显著改善细胞中n-6和n-3 PUFAs的比例,通过细胞增殖及凋亡实验,发现Fat-1基因能有效抑制人口腔鳞癌细胞的增殖并促进细胞凋亡。本研究为探讨n-3 PUFAs对口腔鳞癌的作用并建立体外移植模型打下了良好基础。
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PUFAs的合成途径Fig.1Pathwaysofpolyunsaturatedfattyacidsynthesis营养科学发现，双键所在的位置影响脂肪酸的营养价值,一般从脂肪酸分子结构的两端第一个碳原子开始编号以确定双链的位置
DHA可以抑制环氧化酶的活性, α-亚麻酸可以抑制A2生成减少，同样能达到抑制血栓的目的[44]。图2显示DHA的机制。.2 降低血液胆固醇和甘油三酯n-3 型多不饱和脂肪酸在降低血液中甘油三酯和胆固醇水平上据报道，实验者给 1 名缺乏α-亚麻酸的病人补充α-亚麻酸乙酯现 EPA 和 DHA 的含量增加了 3～4 倍，血液中胆固醇和甘油三0%[45]。EPA 和 DHA 等还可降低餐后高甘油三酯血症；将其与疗混合型高脂血症上有很好疗效[46]。用 n-3 型多不饱和脂肪酸喂其肝中酰基转移酶和乙酰 CoA 羧化酶活性均有不同程度下降。n肪酸能够促进脂肪酸氧化, 增强脂肪酸向磷脂的转化和
图 1.1 Fat-1 基因拼接示意图Fig.1.1 Schematic Representation of Fat-1 gene splicingCR产物电泳分离的DNA片段大小配制适宜浓度的琼脂糖溶液进行电泳，1 30 min，用凝胶成像系统观察电泳结果并拍照。的片段的回收NA片段琼脂糖凝胶回收试剂盒说明书进行操作。净的刀片切下含有目的 DNA 的琼脂糖凝胶，并且尽量去除的凝胶，将切下来的凝胶收到 1.5mL 的 EP 管中。有切下来的凝胶的 EP 管中加入抽提液，比例为 1（凝胶毫克积微升数）。EP 管置于 50℃水浴锅中温育，直至凝胶完全融化。 1（凝胶毫克数）:1（异丙醇体积微升数）的比例加入异丙醇
【参考文献】：
期刊论文
[1]C. elegans fat-1基因对SGC7901细胞的促凋亡作用[J]. 马志国,蒋正尧. 医学检验与临床. 2008(05)
[2]来源于线虫Caenorhabditis briggssae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因的合成及其功能分析[J]. 朱贵明,陈宏,周艳荣,卢建申,吴晓洁,陈红星,邓继先. 生物工程学报. 2006(05)
[3]应用PCR-酶切连接法合成全长sFat1基因[J]. 朱贵明,陈宏,卢建申,周艳荣,吴晓洁,陈红星,邓继先. 遗传. 2006(09)
[4]ω-6脂肪酸脱氢酶基因在乳腺癌细胞内的表达和作用[J]. 葛银林,耿芳宋,张金玉,张峥,李馨,田润华,徐文华. 中国生物化学与分子生物学报. 2005(03)
[5]不饱和脂肪酸的分离及应用进展[J]. 程朝晖,金波,华文俊. 食品工业科技. 2004(05)
[6]含多不饱和脂肪酸和牛磺酸复方制剂的改善记忆实验[J]. 刘锡潜,高玉忠,戴伟,张天民. 中国生化药物杂志. 2003(05)
[7]Omega-3脂肪酸对心血管的作用及机制[J]. 洪衡,顼志敏. 中华老年医学杂志. 2003(04)
[8]椰油和牛脂对大鼠血脂浓度的影响及可能机制的初步探讨[J]. 徐超,王松涛,王晓红,周波,马国秀,李韫. 中国预防医学杂志. 2003(01)
[9]鱼油多烯脂酸对血小板聚集和抗凝血作用的实验研究[J]. 万瑞香,隋忠国,陈德利,王春波. 中国海洋药物. 2001(04)
[10]富含ω-3多不饱和脂肪酸蛋对高脂血症者的影响[J]. 毕晓莹,谢惠君,章同华,陈福杰. 中华预防医学杂志. 2001(04)
本文编号：2908982
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PUFAs的合成途径Fig.1Pathwaysofpolyunsaturatedfattyacidsynthesis营养科学发现，双键所在的位置影响脂肪酸的营养价值,一般从脂肪酸分子结构的两端第一个碳原子开始编号以确定双链的位置
DHA可以抑制环氧化酶的活性, α-亚麻酸可以抑制A2生成减少，同样能达到抑制血栓的目的[44]。图2显示DHA的机制。.2 降低血液胆固醇和甘油三酯n-3 型多不饱和脂肪酸在降低血液中甘油三酯和胆固醇水平上据报道，实验者给 1 名缺乏α-亚麻酸的病人补充α-亚麻酸乙酯现 EPA 和 DHA 的含量增加了 3～4 倍，血液中胆固醇和甘油三0%[45]。EPA 和 DHA 等还可降低餐后高甘油三酯血症；将其与疗混合型高脂血症上有很好疗效[46]。用 n-3 型多不饱和脂肪酸喂其肝中酰基转移酶和乙酰 CoA 羧化酶活性均有不同程度下降。n肪酸能够促进脂肪酸氧化, 增强脂肪酸向磷脂的转化和
图 1.1 Fat-1 基因拼接示意图Fig.1.1 Schematic Representation of Fat-1 gene splicingCR产物电泳分离的DNA片段大小配制适宜浓度的琼脂糖溶液进行电泳，1 30 min，用凝胶成像系统观察电泳结果并拍照。的片段的回收NA片段琼脂糖凝胶回收试剂盒说明书进行操作。净的刀片切下含有目的 DNA 的琼脂糖凝胶，并且尽量去除的凝胶，将切下来的凝胶收到 1.5mL 的 EP 管中。有切下来的凝胶的 EP 管中加入抽提液，比例为 1（凝胶毫克积微升数）。EP 管置于 50℃水浴锅中温育，直至凝胶完全融化。 1（凝胶毫克数）:1（异丙醇体积微升数）的比例加入异丙醇
【参考文献】：
期刊论文
[1]C. elegans fat-1基因对SGC7901细胞的促凋亡作用[J]. 马志国,蒋正尧. 医学检验与临床. 2008(05)
[2]来源于线虫Caenorhabditis briggssae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因的合成及其功能分析[J]. 朱贵明,陈宏,周艳荣,卢建申,吴晓洁,陈红星,邓继先. 生物工程学报. 2006(05)
[3]应用PCR-酶切连接法合成全长sFat1基因[J]. 朱贵明,陈宏,卢建申,周艳荣,吴晓洁,陈红星,邓继先. 遗传. 2006(09)
[4]ω-6脂肪酸脱氢酶基因在乳腺癌细胞内的表达和作用[J]. 葛银林,耿芳宋,张金玉,张峥,李馨,田润华,徐文华. 中国生物化学与分子生物学报. 2005(03)
[5]不饱和脂肪酸的分离及应用进展[J]. 程朝晖,金波,华文俊. 食品工业科技. 2004(05)
[6]含多不饱和脂肪酸和牛磺酸复方制剂的改善记忆实验[J]. 刘锡潜,高玉忠,戴伟,张天民. 中国生化药物杂志. 2003(05)
[7]Omega-3脂肪酸对心血管的作用及机制[J]. 洪衡,顼志敏. 中华老年医学杂志. 2003(04)
[8]椰油和牛脂对大鼠血脂浓度的影响及可能机制的初步探讨[J]. 徐超,王松涛,王晓红,周波,马国秀,李韫. 中国预防医学杂志. 2003(01)
[9]鱼油多烯脂酸对血小板聚集和抗凝血作用的实验研究[J]. 万瑞香,隋忠国,陈德利,王春波. 中国海洋药物. 2001(04)
[10]富含ω-3多不饱和脂肪酸蛋对高脂血症者的影响[J]. 毕晓莹,谢惠君,章同华,陈福杰. 中华预防医学杂志. 2001(04)
本文编号：2908982
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