Nell-1与APR3在人牙髓细胞分化及矿化中的相互作用及其机制研究

发布时间：2020-12-12 14:40

　　目的:新型信号分子Nel-like molecule-l（Nell-1）是诱导成骨细胞分化及骨形成的重要正调控因子,本课题组前期研究发现它在牙齿发育、牙髓细胞的分化及矿化过程中发挥了重要作用,但其具体分子机制尤其是有无胞内蛋白的参与还不明确。检索文献和String数据库分析蛋白之间的相互作用,已有文献证实Apoptosis related protein 3（APR3）是Nell-1的直接结合蛋白,它在细胞凋亡、自噬、还有成骨细胞分化、矿化及骨形成过程中发挥重要作用。近期有研究表明Nell-1介导的成骨细胞分化和矿化过程中有APR3的协同参与,起到重要正调控作用。由于成骨细胞与成牙本质细胞在蛋白表达谱及胚胎来源上具有相似性,本课题组对Nell-1介导的牙髓细胞分化和矿化过程中是否有APR3参与进行了探讨并对其信号路径机制进行了分析。方法:本课题首先利用Real-time PCR和Western blot技术检测了体外培养的人牙髓细胞内Nell-1和APR3的表达,通过细胞免疫荧光双染技术检测了 Nell-1和APR3在人牙髓细胞的亚细胞分布和共定位情况;利用免疫共沉淀技术和Wester... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：100 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１?Ａ．网络统计数据

?山东大学博士学位论文???结果??１．人牙髄细胞分离和培养??采用改良组织块法进行体外人牙髓细胞培养，取材１２瓶，有６瓶在７天左??右显微镜下观察到有２－５个细胞爬出组织块边缘，培养细胞用组织块法成功率约??为５０％。爬出的细胞呈贴壁式生长，开始细胞形态不规则，大多数短梭形，偶见??多边形。细胞核位于胞体中央，呈圆形、椭圆形，核仁清晰。分裂期胞内可见??１－４个细胞核。随着培养，传代细胞形态变成细长梭形，细胞排列趋于规律，可??呈束状，平行状等，一般可见２－４个胞浆突。传５代后细胞形态保持良好，与原??代细胞相比形态更规则。??

代细胞相比形态更规则。??ＩＥ?Ｈ??图１－１?ｈＤＰＣｓ原代细胞（１０〇ｘ）?图ｌ－２ｈＤＰＣｓ原代细胞（２０〇ｘ）??图１－３第２代ｈＤＰＣｓ细胞（２０〇ｘ）?图１－４第６代ｈＤＰＣｓ细胞（２０〇ｘ）??１８??


本文编号：2912750