地中海海绵合成多级孔生物玻璃对成骨细胞增殖分化的影响

发布时间：2017-04-07 23:00

  本文关键词：地中海海绵合成多级孔生物玻璃对成骨细胞增殖分化的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：新型多级孔生物活性玻璃(Mesoporous bioactive glass with a hierarchical pore structure,MBG)具有生物活性玻璃材料的成骨生物活性,同时具有介孔和大孔。介孔孔径在2-50nm,可以装载多种小分子药物,且对药物有控释作用而被用于靶向药物输送;大孔孔径大于50nm,可以相互连通成网络,构成可使细胞长入的通道和空间,有利于引导骨细胞在孔壁上生长,同时有利于营养物质传输到再生组织的中央,为新生骨组织提供营养。因MBG有以上的优点而成为近年的研究热点,在骨组织重建等研究中有广阔的应用前景。以地中海海绵为模板合成的新型多级孔生物活性玻璃是由吉林大学食品科学与工程学院自主研制的,具有多级孔生物玻璃的优点,目前已证实,同以人工材料为模板的多级孔生物活性玻璃相比,该新型材料具有来源丰富,价格低廉,环境友好的优点,因而具有较好的应用前景。目前该新型材料的生物学活性有待深入研究。目的:本研究以人源性成骨细胞MG63为实验目的细胞,通过MTT法、PNPP法、实时定量PCR法检测MBG对成骨细胞增殖、分化的影响,旨在探讨地中海海绵合成多级孔生物玻璃对人源性成骨样细胞MG63增殖、分化的影响。方法:冻存MG63细胞系复苏后培养,分别使用MBG和普通生物玻璃72h浸提液、空白培养基与细胞共培养,在1、3、5d,使用MTT法对细胞增殖进行测定;MG63分别与多级孔生物玻璃和普通生物玻璃72h浸提液、空白培养基共培养,在1、3、5d,使用PNPP法检测细胞内碱性磷酸酶活性;MG63与多级孔生物玻璃和普通生物玻璃72h浸提液、空白培养基共培养,实时定量PCR法检测24h各组成骨相关基因Runx2、Sp7的m RNA表达水平。采用配对t检验的方法,P0.05为差异有统计学意义。结果:与普通生物玻璃组和空白对照组相比,MBG组在1、3、5d均可促进MG63增殖(P0.01),且各时间点都可以增强MG63细胞内ALP活性(P0.01);各组共培养24h后,MBG组较其他组可明显上调成骨细胞特异性转录因子Sp7m RNA的表达(P0.01),但对Runx2 m RNA的表达无显著影响。结论:地中海海绵合成多级孔生物玻璃(MBG)对细胞无毒性,有显著的促进成骨细胞增殖的作用;MBG能上调成骨细胞中ALP表达,证明该新型生物活性玻璃具有促成骨细胞成骨分化的作用;MBG上调成骨细胞中Sp7表达,证明该新型生物活性玻璃有促成骨的作用;本研究结果显示出MBG具有促进成骨细胞增殖与分化的作用,提示MBG具有促成骨作用,其成骨作用优于普通生物玻璃材料。
【关键词】：生物活性玻璃 成骨细胞 碱性磷酸酶 细胞增殖 细胞分化
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R783.1
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 引言11-16
• 1.1 生物活性玻璃研究进展12-13
• 1.2 介孔生物活性玻璃研究进展13-14
• 1.3 多级孔生物玻璃研究进展14
• 1.4 本文研究背景及内容14-16
• 第2章 地中海海绵合成多级孔生物玻璃生物学性能的研究16-20
• 2.1 主要仪器与试剂16-17
• 2.2 细胞与材料17-18
• 2.2.1 细胞的培养17
• 2.2.2 浸提液的制备17-18
• 2.3 生物学活性测试18-20
• 2.3.1 MG63细胞增殖检测18
• 2.3.2 MG63细胞内碱性磷酸酶活性检测18
• 2.3.3 MG63细胞内成骨相关基因Sp7 mRNA检测18-20
• 第3章 实验结果20-22
• 3.1 MBG促进MG63细胞增殖20
• 3.2 MBG促进MG63细胞内ALP活性20-21
• 3.3 MBG上调MG63细胞内成骨相关基因Sp7 mRNA的表达21-22
• 第4章 讨论22-26
• 第5章 结论26-27
• 参考文献27-34
• 作者简介及在读期间所取得的研究成果34-35
• 致谢35

【参考文献】

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本文编号：291488