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siRNA抑制人舌癌细胞VEGF表达对MMP-2,-9及TIMP-1,-2蛋白表达的影响

发布时间:2020-12-15 16:53
  目的利用小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)抑制人舌癌Tca8113细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达,观察其对培养细胞和移植瘤基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs) -2, -9及基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases, TIMPs) -1, -2蛋白表达的影响。方法以稳定转染携带VEGF-siRNA真核表达载体的人舌癌Tca8113细胞(VEGF-siRNA1、VEGF-siRNA2)为实验组,以转染空载体的人舌癌Tca8113细胞及未转染的人舌癌Tca8113细胞为实验对照组和空白对照组。20只裸鼠随机分为4组,每组5只,将各组细胞分别接种于裸鼠皮下。47天后,剥离瘤体。用免疫细胞化学法及免疫组织化学法分别测定各组培养细胞和移植瘤VEGF, MMP-2, -9及TIMP-1, -2的蛋白表达;并用明胶酶谱法(gelatin zymography)及蛋白免疫印迹法(west... 

【文章来源】:广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

siRNA抑制人舌癌细胞VEGF表达对MMP-2,-9及TIMP-1,-2蛋白表达的影响


MMP-2,-9及TIMP-1,-2免疫细胞化学染色(SP,×400)

移植瘤,HE染色


移植瘤组织经常规 HE 染色后,镜下见瘤体细胞中有异常核浆比例及血管窦,并可见核分裂相,证实为肿瘤组织(如图 2-1 所示)。图2-1 移植瘤组织HE染色(HE,×100)Fig. 2-1 representative H&E staining features of the xenograft tumor (H&E, ×100 magnification)2.3.2 免疫组织化学染色结果1.各组移植瘤 VEGF 表达比较 VEGF 表达的阳性颗粒主要位于肿瘤细胞的胞浆内, 少数肿瘤血管内皮细胞胞浆内也可见阳性颗粒(如图 2-10示)。实验组的 VEGF 表达较两对照组明显下降,VEGF-siRNA1 与实验对照组和空白对照组相比较平均阳性表达率降低,有显著差异(P=0.00),平

移植瘤,免疫组化染色


29图2-10 各移植瘤VEGF免疫组化染色结果(SP, ×400)Fig. 2-10 representative immunohistochemistry staining features of VEGF (SP, ×400 magnification)(1: VEGF-siRNA1 group; 2: VEGF-siRNA2 group; 3: experimental control; 4: negative control)图2-11 各移植瘤MMP-2免疫组化染色结果(SP, ×400)Fig. 2-11 representative immunohistochemistry staining features of MMP-2 (SP, ×400 magnification)(1: VEGF-siRNA1 group; 2: VEGF-siRNA2 group; 3: exper


本文编号:2918580

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