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粪肠球菌脂磷壁酸诱导人牙周膜成纤维细胞表达TLR2及IL-1β的研究

发布时间:2020-12-24 13:22
  目的研究粪肠球菌脂磷壁酸(Enterococcus faecalis Lipoteichoic acid, E. faecalis LTA)作用于人牙周膜成纤维细胞(Human periodontal ligament cells, HPDLCs)后,细胞表面TLR2表达及分泌IL-1β的改变,探讨粪肠球菌对人牙周膜成纤维细胞表达炎症相关因子的影响。方法以HPDLCs为受试对象,E. faecalis LTA为施加因素1.组织块培养法对HPDLCs进行体外培养、传代及鉴定。2.流式细胞术检测0.1、1、10μg/ml粪肠球菌脂磷壁酸(E. faecalis,LTA)作用于HPDLCs 24小时后,细胞表面Toll样受体2(Toll like receptor 2, TLR2)表达水平的改变,并采用相应浓度的大肠杆菌内毒素(Escherichia coli Lipopolysaccharide, E.coli LPS)作为对照;3. ELISA检测0.1、1、10μg/ml粪肠球菌脂磷壁酸作用HPDLCs12、24、48h后,IL-1β的分泌情况;用anti-TLR2单克隆抗体预处理HP... 

【文章来源】:中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

粪肠球菌脂磷壁酸诱导人牙周膜成纤维细胞表达TLR2及IL-1β的研究


波形丝蛋白染色阳性(xlo)图2一3角蛋白染色阴性(x10)

倒置显微镜,波形丝蛋白,人牙周膜成纤维细胞,角蛋白


图2一1倒置显微镜下第五代Ill, DLcs(x10)2.3.2人牙周膜成纤维细胞免疫组化鉴定细胞波形丝蛋白染色阳性,细胞胞浆棕黄色着色(图2一2),角蛋白染色阴性,细胞胞浆未见棕黄色着色(图2一3)。证明培养的细胞为来自中胚层的间充质细胞。图2一2波形丝蛋白染色阳性(xlo)图2一3角蛋白染色阴性(x10)2.3.3LI陈润激人牙周膜成纤维细胞表达TLRZ情况(表2一1,图表2一1)正常HPDLCs的TLRZ阳性表达极低,口叭刺激24h后,TLRZ阳性细胞率明显上升,与正常对照组及各浓度LPS组相比差异具有统计学意义;且随IJ人浓度升高,几R2阳性细胞率上升,组间差异具有统计学意义(P<0.05);各浓度LPS组刺激24h后

对照组


;彝 102103104 TLRZPE丁LRZPE图2一4无关对照组TLRZ阳性细胞率图2一5对照组TLRZ阳性细胞率LpSO.1LpSI00闪O幻尸O闪扣O盯工仍OnUO00囚0910戊尸O口一仍OnCOO寸01O」月胜州月号:右尹节 102103104TLRZPE下LRZPE图2一6LpS(0.1陀/ml组)TLRZ阳性细胞率图2一7LpS(IPg/ml组)TLRZ阳性细胞率

【参考文献】:
期刊论文
[1]Toll样受体4对人牙周膜成纤维细胞表达p-IRAK1和p-IкB-α的影响[J]. 孙颖,束蓉,张明珠,李超伦.  上海口腔医学. 2007(06)
[2]TLR4对人牙周膜细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响[J]. 孙颖,束蓉,张秀丽,张明珠.  上海交通大学学报(医学版). 2007(06)
[3]炎症信号受体TLR4在大鼠正常牙髓和牙周组织中的分布及意义[J]. 蒋宏伟,凌均棨,任邦鹏.  临床口腔医学杂志. 2006(02)
[4]人正常及炎症牙髓中炎症信号受体TLR4表达的研究[J]. 蒋宏伟,凌均棨,任邦鹏.  牙体牙髓牙周病学杂志. 2005(08)
[5]Toll样受体与脓毒症的研究进展[J]. 李红云,姚咏明,盛志勇.  中华烧伤杂志. 2002(05)

博士论文
[1]牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导细胞炎症反应的信号通路研究及其蛋白酶的构建和对炎症慢性化的研究[D]. 张迪亚.浙江大学 2009



本文编号:2935727

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