PELP1在牙周膜成纤维细胞中的表达及与细胞增殖和成骨分化的相关性研究

发布时间：2020-12-26 04:01

　　牙槽骨是体内容易发生骨质疏松的骨组织，主要表现为牙槽骨高度下降、骨密度降低，从而导致牙齿松动与脱落，直接影响患者牙齿与牙周组织的健康及口腔治疗。牙周组织中功能最重要的是牙周膜成纤维细胞，不仅维持牙周膜的形态和功能，更具有成骨潜力。研究证明，牙周膜成纤维细胞在牙周组织的成骨分化中担当重要角色。作为雌激素靶器官的牙周组织，与雌激素和雌激素受体的关系非常密切。雌激素水平的降低，使破骨细胞数目显著增加，牙槽骨吸收加剧，引起牙槽骨骨密度的降低。雌激素水平升高后，破骨细胞数目得到抑制，骨密度增高。雌激素受体也与牙周组织关系密切。实验证明，在牙周病大鼠模型中，雌激素受体表达量是显著下降的。如果抑制了雌激素受体的表达，牙周膜细胞的骨向分化能力显著降低。脯氨酸-胱氨酸-亮氨酸蛋白1（praline-,glutamic acid-,and leucine-rich protein1，PELP1）是雌激素和雌激素受体的重要调节因子，在雌激素很多靶器官中表达，如脑、乳腺、子宫等。PELP1的表达具有差异性，可以表达在胞核，也可以表达在胞浆，其表达与细胞的生物学功能相一致。胞核中表达的PELP1主要参与基因信号... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
缩略语表
中文摘要
Abstract
前言
文献回顾
    一、雌激素信号通路的研究进展
    二、 PELP1 的结构与功能
    三、雌激素、雌激素受体及调节因子 PELP1 与牙周组织的健康
实验一 PELP1 在大鼠牙周组织中的表达及其影响因素
    1 材料
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2 方法
        2.1 实验动物及分组
        2.2 大鼠标本取材与处理
        2.3 大鼠牙周组织石蜡切片及免疫组化
        2.4 RT-PCR
        2.5 统计学分析
    3 结果
        3.1 大鼠血清雌激素水平
        3.2 PELP1 在大鼠牙周组织中的表达
        3.3 PELP1 阳性细胞计数分析
        3.4 PELP1mRNA 在大鼠牙周组织中的表达
    4 讨论
实验二 PELP1在大鼠牙周膜成纤维细胞中的表达及与细胞增殖和成骨分化的相关性研究
    1 材料
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2 方法
        2.1 rPDLFCs 的分离培养
        2.2 免疫细胞化学染色
        2.3 RT-PCR
        2.4 Western blot
        2.5 MTT
        2.6 si-PELP1 转染体外培养的 rPDLFCs
        2.7 rPDLFCs 的成骨诱导
        2.8 Realtime-PCR 检测
        2.9 统计学分析
    3 结果
        3.1 rPDLFCs 的鉴定
        3.2 PELP1 在 rPDLFCs 中的表达
        3.3 瞬转 siRNA 后细胞中 PELP1 的表达
        3.4 PELP1mRNA 及蛋白的表达与细胞增殖及成骨分化的关系
        3.5 PELP1 与细胞成骨分化相关性的验证
    4 讨论
实验三 PELP1在人牙周炎牙周膜成纤维细胞中的表达及与细胞增殖和成骨分化的相关性研究
    1 材料
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2 方法
        2.1 I-hPDLCs 的分离培养
        2.2 免疫细胞化学染色
        2.3 RT-PCR
        2.4 Western blot 检测
        2.5 I-hPDLFCs 细胞的成骨诱导
        2.6 Realtime-PCR 检测
        2.7 MTT 检测
        2.8 统计学分析
    3 结果
        3.1 hPDLFCs 的生长与鉴定
        3.2 PELP1 在 H-hPDLFCs 和 I-hPDLFCs 中的表达
        3.3 PELP1 与健康和牙周炎组织来源的牙周膜细胞生长的相关性
        3.4 PELP1与两种牙周膜成纤维细胞成骨分化的相关性
    4 讨论
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢



本文编号：2939000