ASCs复合PRF促进自体移植脂肪血管化的实验研究
发布时间：2021-01-02 15:11
【背景】由于各种先天性畸形、创伤、肿瘤切除术等原因造成的软组织缺损，是目前临床上修复治疗的一大难题之一。患者自体的脂肪组织具有来源充足、取材方便且无任何免疫排斥反应等优点，目前被认为是修复各种软组织缺损的比较好的自体填充材料。但目前常用的自体脂肪移植方法常导致移植脂肪出现一些吸收、萎缩、液化或坏死，充填的组织量难以精确掌握等缺点而严重影响修复效果，给广大患者和医生带来极大的困扰。随着各种研究技术的不断发展，脂肪移植技术有了进一步的发展。我们课题组前期研究发现以来源于脂肪组织的血管基质成分复合自体的富血小板纤维蛋白进行的脂肪移植，较显著地提高了移植脂肪的存活率。但其相关机理机制不清，因此本实验研究以脂肪干细胞（adipose-derived stem cells, ASCs）和富血小板纤维蛋白（platelet-rich plasma，PRF）作为改善移植脂肪血管化微环境，探讨ASCs和PRF在改善脂肪移植效果及其相关作用机理。【目的】探讨ASCs、PRF改善脂肪移植效果及其相关作用机理，为构建新型脂肪组织工程复合材料提供理论和实验依据。【方法】1、从家兔脂肪组织中分离培养出脂肪干细胞，...
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：93 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
第三代脂肪干细胞生长曲线
组呈阴性结果（附图 3A）。诱导：经成骨诱导的 ASCs 呈重叠生长，细胞形态多边形等，并分泌较多的细胞外基质，出现颗粒状的延长，钙盐沉积慢慢形成大小不等的钙结节，进后，经诱导的细胞碱性磷酸酶染色见局部区域呈蓝 周后经茜素红染色，钙盐沉积处见红染的团块状， ASC 分化为成骨细胞。而对照组呈阴性结果。（附干细胞流式分析胞表面抗原 CD 分子的流式细胞仪检测结果显示， 89.4%±3.5，而 CD31 呈阴性表达，约 3.8%±1.2，表 的 CD 分子表型特征，对照组呈阴性结果。（图 2）
比较各实验组统计学差异，P<0.05，差异有显著统放血管内皮生长因子（VEGF）的含量变化SA 检测结果可知，PRF 释放 VEGF 呈现一定规律性内持续释放 VEGF，其特点呈现前 4h 释放的速度较放缓，3～7d 仍持续释放 VEGF，但速度明显减慢，果相符[84]。同时结果发现，不同材质的制备的 PRF 释放 VEGF 特性存在一定影响[85]，实验结果发现玻保存温度更利于 PRF 释放 VEGF，提示这两种因素定影响，见图 4，具有统计意义，P<0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]富血小板纤维蛋白体外释放VEGF影响因素的探讨[J]. 李龙,赵建辉,刘斌,令狐大科,刘彦普,梁丽华,杨勇,杨涛. 中国美容医学. 2012(03)
[2]大鼠BMSCs体外诱导培养后连接蛋白40及超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4表达的初步研究[J]. 宋波,廖斌,于风旭,夏增亮. 中国修复重建外科杂志. 2012(02)
[3]可注射自体脂肪组织移植动物模型的建立[J]. 谭新颖,张海霞,刘斌,刘彦普,李龙,徐小方,令狐大科,安然. 实用口腔医学杂志. 2011(02)
[4]自体基质血管成分改善脂肪组织移植效果的实验研究[J]. 谭新颖,张海霞,刘斌,刘彦普,徐小方,李龙,令狐大科,徐海燕. 中国美容医学. 2011(03)
[5]血管内皮细胞生长因子基因转染血管内皮祖细胞移植提高移植脂肪存活率的实验研究[J]. 易成刚,郭树忠,张琳西,夏炜,韩岩,舒茂国,张辉,周庆红. 中华外科杂志. 2005(11)
本文编号：2953130
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：93 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
第三代脂肪干细胞生长曲线
组呈阴性结果（附图 3A）。诱导：经成骨诱导的 ASCs 呈重叠生长，细胞形态多边形等，并分泌较多的细胞外基质，出现颗粒状的延长，钙盐沉积慢慢形成大小不等的钙结节，进后，经诱导的细胞碱性磷酸酶染色见局部区域呈蓝 周后经茜素红染色，钙盐沉积处见红染的团块状， ASC 分化为成骨细胞。而对照组呈阴性结果。（附干细胞流式分析胞表面抗原 CD 分子的流式细胞仪检测结果显示， 89.4%±3.5，而 CD31 呈阴性表达，约 3.8%±1.2，表 的 CD 分子表型特征，对照组呈阴性结果。（图 2）
比较各实验组统计学差异，P<0.05，差异有显著统放血管内皮生长因子（VEGF）的含量变化SA 检测结果可知，PRF 释放 VEGF 呈现一定规律性内持续释放 VEGF，其特点呈现前 4h 释放的速度较放缓，3～7d 仍持续释放 VEGF，但速度明显减慢，果相符[84]。同时结果发现，不同材质的制备的 PRF 释放 VEGF 特性存在一定影响[85]，实验结果发现玻保存温度更利于 PRF 释放 VEGF，提示这两种因素定影响，见图 4，具有统计意义，P<0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]富血小板纤维蛋白体外释放VEGF影响因素的探讨[J]. 李龙,赵建辉,刘斌,令狐大科,刘彦普,梁丽华,杨勇,杨涛. 中国美容医学. 2012(03)
[2]大鼠BMSCs体外诱导培养后连接蛋白40及超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4表达的初步研究[J]. 宋波,廖斌,于风旭,夏增亮. 中国修复重建外科杂志. 2012(02)
[3]可注射自体脂肪组织移植动物模型的建立[J]. 谭新颖,张海霞,刘斌,刘彦普,李龙,徐小方,令狐大科,安然. 实用口腔医学杂志. 2011(02)
[4]自体基质血管成分改善脂肪组织移植效果的实验研究[J]. 谭新颖,张海霞,刘斌,刘彦普,徐小方,李龙,令狐大科,徐海燕. 中国美容医学. 2011(03)
[5]血管内皮细胞生长因子基因转染血管内皮祖细胞移植提高移植脂肪存活率的实验研究[J]. 易成刚,郭树忠,张琳西,夏炜,韩岩,舒茂国,张辉,周庆红. 中华外科杂志. 2005(11)
本文编号：2953130
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