Cofilin在成骨细胞力学信号转导中的作用研究

发布时间：2021-01-03 04:42

　　正常骨骼处于一个吸收与重建的动态平衡状态中，其中力刺激是维持平衡的基础。不断有研究证实，牵张应力是有效促进成骨活性和功能的力学刺激。体内外力刺激通过多种途径被成骨细胞所感知，通过一系列的级联网络反应，成骨细胞将力学信号转化为生物学信号，进一步调节相关基因的表达水平，同时合成各种活性物质及酶类，最终使得机体表现出各种复杂的生理及病理活动。多种信号转导途径中，细胞骨架作为首先感受力学刺激的结构，发挥着重要作用。成骨细胞对外源性机械力信号的反应主要是由F-actin来响应的，F-actin通过与跨膜分子相互作用而成为跨膜力信号传递的主要环节。而成骨细胞细胞骨架的改建依赖于一些对力学敏感的关键蛋白的调控作用。ADF/Cofilin家族蛋白是actin结合蛋白中独一无二的解聚微丝的蛋白群，其对肌动蛋白发挥着重要调控作用：当肌动蛋白丝激活时，ADF/Cofilin家族蛋白能够切断肌动蛋白丝，增加肌动蛋白单体在肌丝末端的解聚合。这提示我们Cofilin在细胞骨架力学转导信号中发挥着重要作用。而以往的研究主要集中在内皮、神经、肌肉细胞中，对于成骨细胞的研究尚未见报道。本实验通过Flexcell应力加载... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组细胞Cofilin免疫荧光染色情况

d e f图 1 各组细胞 Cofilin免疫荧光染色情况（蓝色荧光区域表示细胞核，红色荧光区域为 Cofilin 表达位置）a：0h 加载组 MG-63 细胞内 Cofilin 染色观察（800x）b：1h 加载组 MG-63 细胞内 Cofilin 染色观察（800x）c：4h 加载组 MG-63 细胞内 Cofilin 染色观察（800x）d：8h 加载组 MG-63 细胞内 Cofilin 染色观察（800x）e：12h 加载组 MG-63 细胞内 Cofilin 染色观察（800x）f：24h 加载组 MG-63 细胞内 Cofilin 染色观察（800x）3.2 各组细胞中 Cofilin mRNA 表达情况：见图 2 和图 3。半定量 RT-PCR 结果显示，随牵张应力作用时间的延mRNA 水平无明显变化，ANOVA 方差分析显示，各组差异无统计学意义各实验组与对照组之间 Cofilin mRNA 水平也没有显著性差异（p>0.05），水平，Cofilin含量并无明显变化。

不同牵张应力加载时长下 MG-63细胞内 Cofilin mRNA 表达的情况（*表示 p> MG-63 细胞中 Cofilin 含量变化： 4 和图 5。WesternBlot 结果显示，力学刺激后，Cofilin表达明显上h组）相比，cofilin表达在加载 1h后已增加（p<0.01），4h时增加最明显12、24h有所下降，但仍明显高于对照组（p<0.01）。ANOVA 方差分异有统计学意义（p<0.05）。两两比较显示，各组间差异均有统计5）。 Western Blot检测各组细胞 Cofilin含量（1:0h 加载组，2:1h 加载组，3:4h 加载4:8h 加载组，5:12h 加载组，6:24h 加载组 GAPDH：磷酸甘油醛脱氢酶）

【参考文献】：
期刊论文
[1]不同牵张力对成骨细胞增殖与合成功能的影响[J]. 韩磊,李煌,赵计林,唐国华.  实用口腔医学杂志. 2012(06)
[2]机械牵张应力刺激成骨细胞的差异蛋白质组学研究[J]. 李菲菲,丁寅,冯雪,王欢,陈富林,李立文.  医用生物力学. 2010(06)
[3]微丝在碱性成纤维细胞生长因子调节伤口愈合中的作用[J]. 顾海峰,何清濂,林子豪,刘麒,张杏梅.  中华创伤杂志. 2000(06)



本文编号：2954337