miR-23a和miR-30a对炎性环境下成骨细胞生物学活性的影响研究
发布时间：2021-01-15 14:30
牙周炎是危害最广泛的慢性炎性骨吸收性疾病。目前，临床上治疗牙周病的常用方法是基础治疗、药物治疗及手术治疗等，但均难以获得理想的牙周骨组织再生修复。骨代谢平衡是由成骨细胞和破骨细胞协同完成的。在炎性环境下，成骨细胞功能受抑是骨代谢失衡的关键环节。有大量研究证实炎症因子可通过不同信号通路调控成骨细胞分化，而miRNA的发现使研究目光着眼于转录后水平的调控。miRNA是一类进化上高度保守的长度约22nt的内源性小分子RNA，参与转录后水平的基因调控。它与很多生命过程和某些疾病的发生发展均有紧密联系。目前研究认为某些miRNA的表达改变与牙周炎的发生相关。此外，成骨细胞的分化过程也与miRNA有关。然而到目前为止，国内外学者的研究只是停留于发现和报道参与调控牙周炎疾病发生发展的特定miRNA分子群；以及调控骨分化成熟的特定miRNA分子群。但对共同调节着牙周炎和骨分化的分子：miR-23a和miR-30a，以及它们对炎性微环境下成骨细胞生物学功能的调控作用和对牙周炎性骨缺失发生机制的研究尚未见报道。基于以上研究背景，本研究通过建立大鼠牙周炎动物模型及LPS刺激成骨细胞模拟体外炎性微环境，探讨在...
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PDLCs细胞形态（A：原代细胞；B：第四代PDLCs）
图 2 PDLCs 细胞形态（A：原代细胞；B：第四代 PDL细胞 MC3T3-E1 成骨分化能力检测细胞 MC3T3-E1 传代生长良好，平均 2-3 天即可再次传代（液诱导 21 天后茜素红染色及诱导 7 天后 ALP 染色，结果显化诱导后有大量矿化结节产生（图 3B）；ALP 染色显示该细图 3C）。Real-time PCR 检测结果显示，MC3T3-E1 细胞经成Runx2、OCN 表达均较对照组增加（图 3D），差异有统计学意说明实验所用细胞系分化能力好，能够满足后续实验研究需A BA B
第四军医大学硕士学位论文2.5 统计学分析采用 SPSS14.0 统计软件进行数据分析。两组样本间比较采用 t 检验；三组及上比较时采用单因素方差分析。P<0.05 认为有统计学意义。3 结果3.1 转染效率检测转染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 和 inhibitor 后，细胞形态无明显改变。荧倒置显微镜观察 Cy-3 标记的 siRNAnegative control 可见约有 80%的细胞内转入且中在胞浆区。Real-time PCR 结果显示，转染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 后，其达量分别升高近 800 和 1000 倍左右。而转染 miR-23a 和 miR-30a 的 inhibitor 后，表达量分别降低约 5 和 3 倍。AB
【参考文献】：
期刊论文
[1]Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J]. Yu-feng Xie1, Rong Shu1*, Shao-yun Jiang1, Da-li Liu1, Xiu-li Zhang2 1Department of Periodontology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China; 2Shanghai Research Institute of Stomatology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China. International Journal of Oral Science. 2011(03)
[2]miRNA对免疫和炎症反应的调节功能[J]. 谢玉峰,束蓉. 口腔医学研究. 2011(06)
[3]成年人牙周炎流行因素的研究[J]. 赵雪,刘静波,王宏岩,孙尚敏,潘亚萍. 口腔医学研究. 2006(06)
[4]细胞因子与溶骨增强[J]. 童安莉,陈璐璐,丁桂芝. 中国骨质疏松杂志. 2000(02)
本文编号：2979032
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PDLCs细胞形态（A：原代细胞；B：第四代PDLCs）
图 2 PDLCs 细胞形态（A：原代细胞；B：第四代 PDL细胞 MC3T3-E1 成骨分化能力检测细胞 MC3T3-E1 传代生长良好，平均 2-3 天即可再次传代（液诱导 21 天后茜素红染色及诱导 7 天后 ALP 染色，结果显化诱导后有大量矿化结节产生（图 3B）；ALP 染色显示该细图 3C）。Real-time PCR 检测结果显示，MC3T3-E1 细胞经成Runx2、OCN 表达均较对照组增加（图 3D），差异有统计学意说明实验所用细胞系分化能力好，能够满足后续实验研究需A BA B
第四军医大学硕士学位论文2.5 统计学分析采用 SPSS14.0 统计软件进行数据分析。两组样本间比较采用 t 检验；三组及上比较时采用单因素方差分析。P<0.05 认为有统计学意义。3 结果3.1 转染效率检测转染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 和 inhibitor 后，细胞形态无明显改变。荧倒置显微镜观察 Cy-3 标记的 siRNAnegative control 可见约有 80%的细胞内转入且中在胞浆区。Real-time PCR 结果显示，转染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 后，其达量分别升高近 800 和 1000 倍左右。而转染 miR-23a 和 miR-30a 的 inhibitor 后，表达量分别降低约 5 和 3 倍。AB
【参考文献】：
期刊论文
[1]Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J]. Yu-feng Xie1, Rong Shu1*, Shao-yun Jiang1, Da-li Liu1, Xiu-li Zhang2 1Department of Periodontology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China; 2Shanghai Research Institute of Stomatology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China. International Journal of Oral Science. 2011(03)
[2]miRNA对免疫和炎症反应的调节功能[J]. 谢玉峰,束蓉. 口腔医学研究. 2011(06)
[3]成年人牙周炎流行因素的研究[J]. 赵雪,刘静波,王宏岩,孙尚敏,潘亚萍. 口腔医学研究. 2006(06)
[4]细胞因子与溶骨增强[J]. 童安莉,陈璐璐,丁桂芝. 中国骨质疏松杂志. 2000(02)
本文编号：2979032
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