IL-17对破骨细胞MMP-9表达水平的影响

发布时间：2017-04-26 13:07

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【摘要】：目的:检测白介素-17(Interleukin-17,IL-17)对破骨细胞细胞基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达水平的影响,为研究IL-17在正畸力致牙根吸收过程中的作用提供参考。方法:对小鼠单核/巨噬系细胞RAW264.7进行破骨细胞诱导,并通过抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色鉴定破骨细胞诱导成功。本实验分为实验组和对照组,实验组在培养液中加入梯度浓度0.1、1.0、10和100 ng/m L的IL-17,依次设为a组、b组、c组和d组,对照组不加IL-17。采用酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测破骨细胞诱导第3 d、4 d和5 d时培养液中MMP-9蛋白的表达水平,采用逆转录-聚合酶链式反应(Reverse-Transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测破骨细胞诱导第3 d、4 d和5 d时培养液中MMP-9m RNA的表达水平,并对检测结果进行统计学分析。结果:1、破骨细胞TRAP染色:RAW264.7细胞诱导培养3~5 d后,可见TRAP染色阳性细胞,体积大,多核(核≥3个),细胞核呈紫蓝色,胞浆中抗酒石酸酸性磷酸酶活性部位呈紫红色颗粒。2、ELISA检测:在破骨细胞诱导第3 d时,与对照组比较,d组MMP-9的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P0.05);在破骨细胞诱导第4 d和第5 d时,与对照组比较,b组、c组和d组MMP-9的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。c组的MMP-9蛋白表达水平均高于b组,d组的MMP-9蛋白表达水平均高于c组,差异有统计学意义(P0.05)。3、RT-PCR检测:在破骨细胞诱导第3 d、4 d和5 d时,与对照组比较,a组、b组、c组和d组的MMP-9 m RNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05)。同一时间下的各实验组间比较均有统计学差异(P0.05)。各组在破骨细胞诱导第5 d时的MMP-9 m RNA表达水平均高于第3 d和第4 d,差异有统计学意义(P0.05)。结论:IL-17可以促进破骨细胞MMP-9表达,且促进作用随着IL-17浓度的增加而增强。提示IL-17对破骨细胞的调控作用除直接促进破骨细胞的分化和作为核因子κB受体活化因子配体(Receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)的诱导剂以外,还可能通过促进MMP-9表达,进而影响破骨细胞的迁移和增强其降解骨基质的能力来实现。
【关键词】：白介素-17 基质金属蛋白酶-9 RAW264.7
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R783.5
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 中英文对照表11-12
• 第1章 绪论12-18
• 1.1 研究背景12-17
• 1.1.1 正畸致牙根吸收的研究进展12-14
• 1.1.2 IL-17与正畸炎性根吸收的相关性14-15
• 1.1.3 MMP-9 与正畸炎性根吸收的相关性15-17
• 1.2 立题依据及研究目的17-18
• 第2章 实验材料与方法18-28
• 2.1 实验材料18-19
• 2.1.1 主要材料和试剂18-19
• 2.1.2 主要仪器及设备19
• 2.2 实验方法19-28
• 2.2.1 RAW264.7 细胞的培养方法19-21
• 2.2.2 破骨细胞的诱导21
• 2.2.3 破骨细胞TRAP染色21-22
• 2.2.4 ELISA法检测MMP-9 蛋白的表达水平22-24
• 2.2.5 RT-PCR法检测MMP-9 mRNA的表达水平24-27
• 2.2.6 统计学分析27-28
• 第3章 实验结果28-33
• 3.1 破骨细胞TRAP染色28
• 3.2 ELISA检测MMP-9 蛋白的表达水平28-30
• 3.3 RT-PCR检测MMP-9 mRNA的表达水平30-33
• 第4章 讨论33-41
• 4.1 实验材料及方法的选择33-35
• 4.1.1 小鼠单核/巨噬系细胞RAW264.733
• 4.1.2 破骨细胞的诱导33-34
• 4.1.3 破骨细胞MMP-9 蛋白和mRNA表达水平的测定时间34-35
• 4.2 实验结果分析35-38
• 4.2.1 IL-17对破骨细胞MMP-9 蛋白和mRNA表达水平的影响35-37
• 4.2.2 破骨细胞MMP-9 mRNA和蛋白表达的差异性37-38
• 4.3 IL-17在正畸牙根吸收过程中的可能作用机制38-40
• 4.4 总结40-41
• 第5章 结论41-42
• 参考文献42-51
• 作者简介及在读期间成果51-52
• 致谢52-53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 仝锡帅;顾建红;王东;陈阳;卞建春;刘宗平;;Ca~(2+)信号对1α,25-(OH)_2D_3调控破骨细胞形成及骨吸收活性的影响[J];营养学报;2015年05期

2 付应霄;顾建红;王怡;袁燕;刘学忠;卞建春;刘宗平;;RAW264.7细胞分化为破骨细胞的凋亡观察[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);2015年01期

3 范瑞贤;李晓智;;白细胞介素-17与正畸牙根吸收相关性研究进展[J];现代口腔医学杂志;2013年03期

4 董强;夏茜;马洪;王永;;维生素D_3联合地塞米松诱导大鼠破骨细胞的体外培养[J];贵阳医学院学报;2012年05期

5 刘鑫;向学熔;范小平;杨光玉;李亚奇;;人牙髓中基质金属蛋白酶-9受正畸力作用影响的初步分析[J];重庆医科大学学报;2009年08期

6 黄晓斌;孙元明;李雨民;杨福军;;破骨细胞分化成熟因子及其信号转导通路[J];中国骨质疏松杂志;2007年11期

7 庄丽;白玉兴;;基质金属蛋白酶在正畸源性牙根吸收中的作用[J];北京口腔医学;2007年05期

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 张yN;牙龈卟啉单胞菌脂多糖对成骨细胞—破骨细胞间EphB4-ephrinB2双向传导信号的影响[D];吉林大学;2013年

2 韩光红;不同正畸力值对牙髓活力、Fos和MMP-9蛋白表达变化作用的实验研究[D];吉林大学;2012年

3 张凡;白细胞介素17促进成骨细胞诱导破骨样细胞分化的作用和机制[D];山东大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 罗俊;细胞因子IL-17A在牙根吸收过程中表达的实验研究[D];南昌大学;2012年

2 张锦苹;正畸力对龈沟液中白介素-17表达影响的研究[D];天津医科大学;2011年

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本文编号：328513