牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白诱导内皮细胞炎症反应的信号通路研究
发布时间:2022-01-01 09:28
目的比较分析不同fimA型P.gingivalis菌毛蛋白诱导人脐静脉血管内皮细胞炎症反应的相关信号转导。方法 1.厌氧培养并鉴定ⅡfimA型(WCSP115)和ⅣfimA型(W83)P.gingivalis,收集菌液提取细菌DNA,克隆ⅡfimA型和ⅣfimA型P.gingivalis fimA序列,构建fimA的原核表达系统pET-30a-FimABL21DE3,IPTG诱导表达重组菌毛蛋白rFimA;2.体外培养HUVECs(CRL-2480),待HUVECs单层融合后,与不同终浓度的P.gingivalis-rFimA(0.5μg/ml、5μg/ml、10μg/m1)共同孵育2h、6h、24h,提取HUVECs总RNA,Real Time-PCR检测CD14、TLR2、TLR4和MyD88的mRNA表达水平,流式细胞术检测HUVECs膜表面CD14、跨膜受体TLR2和TLR4蛋白表达量。结果 1.Ⅱ型或Ⅳ型rFimA蛋白刺激HUVECs,CD14 mRNA表达量增加,且在2h时,Ⅳ型rFimA蛋白诱导HUVECs表达CD14 mRNA的水平高于Ⅱ型rFimA蛋白(P<0....
【文章来源】:第十次全国牙周病学学术会议论文摘要汇编中华口腔医学会会议论文集
【文章页数】:3 页
本文编号:3562090
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