EGCG对口腔舌鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其机制探究
发布时间：2022-01-03 15:40
研究背景及目的本实验旨在探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate,EGCG）对口腔舌鳞状细胞癌（tongue squamous cell carcinoma,TSCC）细胞的抑癌作用,包括对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭生物学表型的影响;探讨EGCG对TSCC细胞的抑制作用是否由TAZ进行介导及其上游可能的调控机制。通过探究TSCC细胞中EGCG与TAZ因子之间的联系,从而丰富EGCG抗口腔癌的分子机制,并尝试找到合适的作用靶点,为EGCG作为TSCC的新型化疗药物提供分子理论基础,也为TSCC的药物治疗提供更多的选择及可能。方法1.检测EGCG对舌鳞状细胞癌CAL27与SCC15细胞增殖的影响。采用CCK-8实验检测不同浓度药物作用24 h后,CAL27细胞与SCC15细胞增殖的变化;不同浓度药物连续作用4-5天,观察CAL27细胞与SCC15细胞生长曲线的变化。并检测增殖相关蛋白Erk、p-Erk、Akt、p-Akt的改变。2.检测EGCG对舌鳞状细胞癌CAL27与SCC15细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度药物作用24 h后,CAL27细...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１：ＥＧＣＧ抑制了?ＣＡＬ２７细胞和ＳＣＣ１５细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖性
?下象限）和晚期凋亡率（右上象限）均呈现上升趋势，ＳＣＣ１５细胞总凋亡率（右??上＋右下象限）的差异具有统计学意义（Ｐ＜０．００１）（图２Ｄ）。??我们采用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ验证不同浓度ＥＧＣＧ是ｍ会引起调亡相关蛋白的??改变。发现随ＥＧＣＧ浓度的升高，抗凋亡基因Ｂｃｌ－２蛋白水平减低，促凋亡基因??Ｂａｘ蛋白水平升高，ＤＮＡ修复酶ＰＡＲＰ减少，其被激活状态Ｃｌｅａｖｅｄ?ＰＡＲＰ蛋白水??平升高（图２Ｅ）。??ＣＡＬ２７细胞??Ａ?．，产?Ｔ７?Ｂ?〇?ｅａｒｌｙ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ??Ｉ??０?８０ｐＭ?１６０ｐＭ?〇?。?？〇?，＜０??ＳＣＣ１５细胞??１００ｐＭ?１５０ｐＭ?２００ｐＭ??０?１００?１６０?２００?ｐＭ??Ｅ?？一讀?Ｂａｘ??？?＿?？?？?Ｂｃｌ－２??ｍｍｍｒｎ?—＊?—?＂Ｈ?ＰＡＲＰ??－Ｃｌｅａｖｅｄ?ＰＡＲＰ??ｍｍ?ｍｍ?ｇａｐｄｈ??￣￣０?８０?１６０?ｍＭ??图２：?ＥＧＣＧ促进了?ＣＡＬ２７细胞和ＳＣＣ１５细胞的凋亡，并呈剂量依赖性。??（Ａ）不同浓度ＥＧＣＧ?（０、８０、１６０＾Ｍ）作用于ＣＡＬ２７细胞２４ｈ后，流式细胞??术检测细胞凋亡。（Ｂ）对ＣＡＬ２７细胞的凋亡率进行统计学分析。（Ｃ）不同浓度??ＥＧＣＧ?（０、１００、１５０、２０〇ｎＭ）作用于ＳＣＣ１５细胞２４ｈ后，流式细胞术检测细??胞凋亡。（Ｄ）对ＳＣＣ１５细胞的凋亡率进行统计学分析。（Ｅ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ实??验检测不同浓度ＥＧＣＧ?（０、８０、１６０?ｐＭ）作用于ＣＡＬ２７细胞２４?ｈ后
划痕实验结果显示，药物作用于ＣＡＬ２７细胞２４?ｈ后，不加药组（对照组）??的迁移率为?６５．００±６．０８％，８０?ｍＭ?ＥＧＣＧ?的迁移率为?１８．６７±３．５２％，１６０?ｐＭ?ＥＧＣＧ??的迁移率为５．００±１．７３％?（图３Ａ）。加药组与不加药组的迁移率相比，差异均具有??统计学意义（Ｐ＜０．００１）（图３Ｂ）。药物作用４８?ｈ后，不加药组（对照组）的迁??移率为?８１．３３±３．５３％，８０?ｎＭ?ＥＧＣＧ?的迁移率为?２４．６７±２．９１％，?１６０?ｍＭ?ＥＧＣＧ?的迁??移率为８．００±１．１６％?（图３Ａ）。加药组与不加药组的迁移率相比，差异均具有统计??学意义（Ｐ＜０．００１）（图３Ｂ）。ＥＧＣＧ的作用时间越长，浓度越高，ＣＡＬ２７细胞迁??移的距离越少，细胞的迁移能力越弱。??药物作用于ＳＣＣ１５细胞２４ｈ后，不加药组（对照组）的迁移率为３９．６７±４．４１％，??１００?ＥＧＣＧ?的迁移率为?２１．３３±１．７６％，１５０?ｎＭ?ＥＧＣＧ?的迁移率为?１２．６７±２．６７％，??２００?＾￡０００的迁移率为５．００±１．７３％（图３〇。加药组与不加药组的迁移率相??比
本文编号：3566533
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１：ＥＧＣＧ抑制了?ＣＡＬ２７细胞和ＳＣＣ１５细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖性
?下象限）和晚期凋亡率（右上象限）均呈现上升趋势，ＳＣＣ１５细胞总凋亡率（右??上＋右下象限）的差异具有统计学意义（Ｐ＜０．００１）（图２Ｄ）。??我们采用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ验证不同浓度ＥＧＣＧ是ｍ会引起调亡相关蛋白的??改变。发现随ＥＧＣＧ浓度的升高，抗凋亡基因Ｂｃｌ－２蛋白水平减低，促凋亡基因??Ｂａｘ蛋白水平升高，ＤＮＡ修复酶ＰＡＲＰ减少，其被激活状态Ｃｌｅａｖｅｄ?ＰＡＲＰ蛋白水??平升高（图２Ｅ）。??ＣＡＬ２７细胞??Ａ?．，产?Ｔ７?Ｂ?〇?ｅａｒｌｙ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ??Ｉ??０?８０ｐＭ?１６０ｐＭ?〇?。?？〇?，＜０??ＳＣＣ１５细胞??１００ｐＭ?１５０ｐＭ?２００ｐＭ??０?１００?１６０?２００?ｐＭ??Ｅ?？一讀?Ｂａｘ??？?＿?？?？?Ｂｃｌ－２??ｍｍｍｒｎ?—＊?—?＂Ｈ?ＰＡＲＰ??－Ｃｌｅａｖｅｄ?ＰＡＲＰ??ｍｍ?ｍｍ?ｇａｐｄｈ??￣￣０?８０?１６０?ｍＭ??图２：?ＥＧＣＧ促进了?ＣＡＬ２７细胞和ＳＣＣ１５细胞的凋亡，并呈剂量依赖性。??（Ａ）不同浓度ＥＧＣＧ?（０、８０、１６０＾Ｍ）作用于ＣＡＬ２７细胞２４ｈ后，流式细胞??术检测细胞凋亡。（Ｂ）对ＣＡＬ２７细胞的凋亡率进行统计学分析。（Ｃ）不同浓度??ＥＧＣＧ?（０、１００、１５０、２０〇ｎＭ）作用于ＳＣＣ１５细胞２４ｈ后，流式细胞术检测细??胞凋亡。（Ｄ）对ＳＣＣ１５细胞的凋亡率进行统计学分析。（Ｅ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ实??验检测不同浓度ＥＧＣＧ?（０、８０、１６０?ｐＭ）作用于ＣＡＬ２７细胞２４?ｈ后
划痕实验结果显示，药物作用于ＣＡＬ２７细胞２４?ｈ后，不加药组（对照组）??的迁移率为?６５．００±６．０８％，８０?ｍＭ?ＥＧＣＧ?的迁移率为?１８．６７±３．５２％，１６０?ｐＭ?ＥＧＣＧ??的迁移率为５．００±１．７３％?（图３Ａ）。加药组与不加药组的迁移率相比，差异均具有??统计学意义（Ｐ＜０．００１）（图３Ｂ）。药物作用４８?ｈ后，不加药组（对照组）的迁??移率为?８１．３３±３．５３％，８０?ｎＭ?ＥＧＣＧ?的迁移率为?２４．６７±２．９１％，?１６０?ｍＭ?ＥＧＣＧ?的迁??移率为８．００±１．１６％?（图３Ａ）。加药组与不加药组的迁移率相比，差异均具有统计??学意义（Ｐ＜０．００１）（图３Ｂ）。ＥＧＣＧ的作用时间越长，浓度越高，ＣＡＬ２７细胞迁??移的距离越少，细胞的迁移能力越弱。??药物作用于ＳＣＣ１５细胞２４ｈ后，不加药组（对照组）的迁移率为３９．６７±４．４１％，??１００?ＥＧＣＧ?的迁移率为?２１．３３±１．７６％，１５０?ｎＭ?ＥＧＣＧ?的迁移率为?１２．６７±２．６７％，??２００?＾￡０００的迁移率为５．００±１．７３％（图３〇。加药组与不加药组的迁移率相??比
本文编号：3566533
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