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人牙本质涎蛋白的基因克

发布时间:2022-01-06 07:48
  牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)属于牙本质非胶原蛋白,占牙本质非胶原蛋白的5%~8%,因与骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)相似而得名。DSP富含谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)和甘氨酸(Gly),由366个氨基酸组成,分子量约为53 000,含30%的碳水化合物和10%的涎酸,有6个潜在的糖基化位点和13个潜在的磷酸化位点。DSP的功能尚不清楚,考虑到DSP在成牙本质细胞中有阳性表达,并在前成釉细胞中有一过性表达,推测DSP可作为成牙本质细胞和相关细胞的标记物,并可能在上皮和间充质之间充当信号分子,参与成牙本质细胞分化。 一、人牙本质涎蛋白的基因克隆、表达、多抗制备和组织表达研究 克隆hDSP成熟肽编码区基因片段并进行原核表达,用异硫氰酸胍一步法从人牙乳头组织中抽提总RNA,再用Oligo(dt)作引物逆转录合成牙乳头cDNA,然后用RT-PCR法,从cDNA中扩增出hDSP基因片段(约600bp),将所得基因片段插入pBluescript质粒载体,转化到大肠杆菌XL1-Blue后,挑选阳性克隆,提取... 

【文章来源】:中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】:100 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
缩略语表
中文摘要
英文摘要
前言
文献回顾
第一部分 人牙本质涎蛋白的基因克隆、表达、多抗制备和组织表达研究
    实验一 人牙本质涎蛋白的基因克隆和序列分析
    实验二 人牙本质涎蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化
    实验三 抗人牙本质涎蛋白抗体的制备和组织表达研究
第二部分 人牙本质涎蛋白全长基因表达载体的构建和真核细胞转染
    实验一 人牙本质涎蛋白真核表达载体的构建
    实验二 用COS-7细胞表达人牙本质涎蛋白基因
第三部分 人牙本质涎蛋白的功能研究
    实验一 人牙本质涎蛋白在人牙胚发育中的表达和意义
    实验二 人牙本质涎蛋白对体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖和碱性磷酸酶的影响
    实验三 人牙本质涎蛋白对牙髓损伤修复影响的动物实验研究
全文总结
致谢
简历、发表论文
附图



本文编号:3572056

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