热疗联合沉默Id-1基因逆转舌鳞癌细胞上皮-间质转化的研究
发布时间：2022-02-11 03:07
研究背景:热疗（Hyperthermia,HT）较常规外科手术和放、化疗不仅具有保护正常组织结构、提高患者生存质量的优势,还能通过逆转肿瘤细胞上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）过程从而降低恶性肿瘤的术后复发率及远处转移率。然而,单独使用热疗治疗肿瘤的效果不佳,临床上通常将热疗与外科手术、放疗、化疗和分子靶向治疗相结合而增强其疗效,其中肿瘤分子靶向治疗近年来成为肿瘤综合疗法的研究热点。研究目的:本课题尝试以分子靶向治疗的方式抑制促癌基因DNA结合分化抑制因子-1（Id-1）的表达,再与热疗进行联合配伍,探索两者联用于舌鳞癌治疗的可能性,特别是观察研究热疗及沉默Id-1基因作用于舌鳞癌细胞后,能否逆转细胞的EMT过程,并初步探讨两者联用作用于舌鳞癌细胞EMT的分子机制。研究方法:1.选取适宜本课题的舌鳞癌细胞株。实时定量PCR实验检测SCC4、SCC9、SCC25和CAL-27 4株舌鳞癌细胞中Id-1 mRNA的表达水平,选取其中Id-1 mRNA表达量最高的细胞株作为本课题的研究细胞。2.验证siRNA沉默Id-1基因表达的能力...
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
转膜夹内的排列顺序Fig1Theorderinthetransmembraneclip
结果 实时定量 PCR 实验检测 4 株舌鳞癌细胞中 Id-1 mRNA 的表达水平检测 4 株舌鳞癌细胞中 Id-1 基因 mRNA 的表达水平，选择 Id-1 mRNA 相对表平最高的细胞系进行后续实验。实时定量 PCR 结果显示（见表 7 和图 2），CAL-胞中 Id-1 mRNA 表达量明显高于 SCC4 细胞、SCC9 细胞以及 SCC25 细胞，故舌鳞癌 CAL-27 细胞株用于本课题的后续研究细胞。表 7 4 株舌鳞癌细胞中 Id-1 mRNA 的表达水平比较Tab 7 Relative expression of Id-1 mRNAdetected by RT-PCR in four strain of STCCGroup Ct(Id-1) Ct(GAPDH) △Ct2-△△CtSCC4 30.17±0.45 14.72±0.12 15.45±0.36 0.3030±0.0798SCC9 30.44±0.66 14.49±0.15 15.95±0.58 0.2226±0.0930SCC25 30.30±0.46 14.43±0.41 15.88±0.80 0.2471±0.1501CAL-27 27.80±0.67 14.09±0.49 13.70±0.18 1.0030±0.1282
青岛大学硕士学位论文将 CAL-27 细胞随机分为 3 组，分别为空白对照组（normal）、阴性对照组（N沉默 Id-1 组（Id-1-siRNA），通过实时定量 PCR 的检测方法对 siRNA 转染 CAL-胞后 Id-1 的 mRNA 表达水平进行测定（见表 8 和图 3）。 Id-1-siRNA 组与空白组相比，Id-1 的 mRNA 表达水平下降 83.29%（P=0.0001）；Id-1-siRNA 组与 N相比，Id-1 的 mRNA 表达水平下降 70.39%（P=0.0003）；空白对照组和 NC 组，无统计学意义（P=0.3011）。表 8 siRNA 转染后细胞内 Id-1mRNA 的表达水平Tab 8 Relative expression of Id-1 mRNA after siRNA transfection of STCCGroup Ct(Id-1) Ct(GAPDH) △Ct2-△△Ctnormal 28.39±0.34 14.39±0.11 14.00±0.45 1.0298±0.1338NC 28.60±0.21 14.44±0.21 14.16±0.20 0.9008±0.1246Id-1-siRNA 30.77±0.19 14.42±0.14 16.35±0.20 0.1969±0.0257
【参考文献】：
期刊论文
[1]热疗对Cal27细胞Id-1、HSF1表达的影响[J]. 孙俊伟,罗丹,刘浩,王升志. 中国口腔颌面外科杂志. 2018(02)
[2]2016年全国热疗年会暨第二届中日医学科技交流协会热疗专业委员会热疗临床进展学术研讨会会议纪要[J]. 王东安,肖绍文. 中华放射肿瘤学杂志. 2017 (01)
[3]Hyperthermia inhibits hypoxia-induced epithelial-mesenchymal transition in HepG2 hepatocellular carcinoma cells[J]. Guang-Jin Yuan, Qian-Wen Li, Shun-Lin Shan, Wu-Ming Wang, Sen Jiang, Cancer Center, the 82nd Hospital of the Chinese People’s Liberation Army, Huai’an 223001, Jiangsu Province, China Xi-Ming Xu, Cancer Center, Renmin Hospital of Wuhan University, Wuhan 430060, Hubei Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2012(34)
[4]Id-1在恶性肿瘤发生中的作用及其机制[J]. 郭斌,张成梅,刘少华. 生命科学. 2010(05)
[5]高温诱导BcaCD885颊癌细胞凋亡及检测[J]. 王升志,洪晓军,何永文,刘流,毛祖彝,童昕. 口腔颌面外科杂志. 2000(03)
本文编号：3619759
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
转膜夹内的排列顺序Fig1Theorderinthetransmembraneclip
结果 实时定量 PCR 实验检测 4 株舌鳞癌细胞中 Id-1 mRNA 的表达水平检测 4 株舌鳞癌细胞中 Id-1 基因 mRNA 的表达水平，选择 Id-1 mRNA 相对表平最高的细胞系进行后续实验。实时定量 PCR 结果显示（见表 7 和图 2），CAL-胞中 Id-1 mRNA 表达量明显高于 SCC4 细胞、SCC9 细胞以及 SCC25 细胞，故舌鳞癌 CAL-27 细胞株用于本课题的后续研究细胞。表 7 4 株舌鳞癌细胞中 Id-1 mRNA 的表达水平比较Tab 7 Relative expression of Id-1 mRNAdetected by RT-PCR in four strain of STCCGroup Ct(Id-1) Ct(GAPDH) △Ct2-△△CtSCC4 30.17±0.45 14.72±0.12 15.45±0.36 0.3030±0.0798SCC9 30.44±0.66 14.49±0.15 15.95±0.58 0.2226±0.0930SCC25 30.30±0.46 14.43±0.41 15.88±0.80 0.2471±0.1501CAL-27 27.80±0.67 14.09±0.49 13.70±0.18 1.0030±0.1282
青岛大学硕士学位论文将 CAL-27 细胞随机分为 3 组，分别为空白对照组（normal）、阴性对照组（N沉默 Id-1 组（Id-1-siRNA），通过实时定量 PCR 的检测方法对 siRNA 转染 CAL-胞后 Id-1 的 mRNA 表达水平进行测定（见表 8 和图 3）。 Id-1-siRNA 组与空白组相比，Id-1 的 mRNA 表达水平下降 83.29%（P=0.0001）；Id-1-siRNA 组与 N相比，Id-1 的 mRNA 表达水平下降 70.39%（P=0.0003）；空白对照组和 NC 组，无统计学意义（P=0.3011）。表 8 siRNA 转染后细胞内 Id-1mRNA 的表达水平Tab 8 Relative expression of Id-1 mRNA after siRNA transfection of STCCGroup Ct(Id-1) Ct(GAPDH) △Ct2-△△Ctnormal 28.39±0.34 14.39±0.11 14.00±0.45 1.0298±0.1338NC 28.60±0.21 14.44±0.21 14.16±0.20 0.9008±0.1246Id-1-siRNA 30.77±0.19 14.42±0.14 16.35±0.20 0.1969±0.0257
【参考文献】：
期刊论文
[1]热疗对Cal27细胞Id-1、HSF1表达的影响[J]. 孙俊伟,罗丹,刘浩,王升志. 中国口腔颌面外科杂志. 2018(02)
[2]2016年全国热疗年会暨第二届中日医学科技交流协会热疗专业委员会热疗临床进展学术研讨会会议纪要[J]. 王东安,肖绍文. 中华放射肿瘤学杂志. 2017 (01)
[3]Hyperthermia inhibits hypoxia-induced epithelial-mesenchymal transition in HepG2 hepatocellular carcinoma cells[J]. Guang-Jin Yuan, Qian-Wen Li, Shun-Lin Shan, Wu-Ming Wang, Sen Jiang, Cancer Center, the 82nd Hospital of the Chinese People’s Liberation Army, Huai’an 223001, Jiangsu Province, China Xi-Ming Xu, Cancer Center, Renmin Hospital of Wuhan University, Wuhan 430060, Hubei Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2012(34)
[4]Id-1在恶性肿瘤发生中的作用及其机制[J]. 郭斌,张成梅,刘少华. 生命科学. 2010(05)
[5]高温诱导BcaCD885颊癌细胞凋亡及检测[J]. 王升志,洪晓军,何永文,刘流,毛祖彝,童昕. 口腔颌面外科杂志. 2000(03)
本文编号：3619759
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/kouq/3619759.html
