miRNA34a外泌体构建及其抑制口腔鳞癌细胞增殖的体外实验研究

发布时间：2022-02-24 11:38

　　目的:运用加载miRNA34a的外泌体治疗口腔鳞状细胞癌。方法:采用超速离心的方法从HEK293细胞的培养上清液中提取外泌体,结合透射电子显微镜、纳米粒子追踪分析仪、Western blot实验鉴定外泌体,进而利用共孵育的方法将疏水性修饰的miRNA34a模拟物加载到外泌体中,以构建含miRNA34a的外泌体（exo-miRNA34a）,倒置荧光显微镜下观察加载效率。将exo-miRNA34a接种于口腔鳞癌细胞HN6中,利用激光共聚焦显微镜观察HN6细胞对外泌体的摄取,结合CCK-8实验检测HN6细胞增殖的变化。结果:在HEK293细胞培养上清液提取物中观察到40～150 nm大小的小囊泡,囊泡粒径分布峰值为97.9 nm;肿瘤易感基因101蛋白（TSG101）和CD63表达阳性,钙联蛋白（Calnexin）表达阴性。疏水改性的mi RNA34a可有效加载到外泌体中,载药率约为47%,载药后外泌体粒径增加,其完整性不受影响。exo-miRNA34a可以进入HN6细胞中,对HN6细胞的增殖具有明显抑制作用（P<0.05）。结论:外泌体介导的mi RNA34a可明显抑制口腔鳞癌HN6... 

【文章来源】：口腔生物医学. 2020,11(02)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

载药前后的外泌体形状(透射电子显微镜)

外泌体粒径分布

Western blot检测细胞和外泌体中CD63、TSG101和Calnexin的表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-34a通过下调SATB2抑制口腔鳞癌增殖、迁移和侵袭的初步研究[J]. 葛昕,詹甜甜,高洁,张勃昕,王晨星,李怀奇,叶金海.  口腔生物医学. 2018(01)



本文编号：3642645