转染HPV16 E5基因对人口腔上皮细胞生物学行为的影响

发布时间：2022-08-04 12:21

　　目的人乳头状瘤病毒（human papilloma virus, HPV）是严格的嗜上皮病毒。人是其唯一的宿主。HPV不但和女性宫颈良、恶性肿瘤有直接联系,还常导致口腔粘膜、食道、咽喉、气管和结膜等部位的病变。该病毒的高危亚型还往往和鳞状上皮细胞的恶变密切相关。E5一般存在于高危型HPV,在导致良性肿瘤的低危型HPV中经常缺省,这一特点可能和高危型HPV的致癌作用具有潜在联系。目前有关HPV的研究大都围绕HPV的癌基因E6、E7展开,而鲜有针对E5基因的研究报道。本实验构建了E5真核表达载体成功转染人口腔上皮细胞,并对上皮细胞相关生物学特性进行了初步分析,研究结果将为深入研究E5基因功能奠定基础。方法①E5基因的PCR扩增与克隆：通过比较高危型HPV全序列,在E5的上下游保守区设计一对引物（分别含有BamHI，HindⅢ阝艰制性酶切位点）,PCR反应,回收纯化产物,获得带有酶切位点的E5基因片段,序列分析；将HPV16 E5连接到质粒pGEM-T,构建质粒pGEM-T-E5,双酶切,测序鉴定。②真核表达载体的构建：设计带有一对酶切位点（HindⅢ, BamHⅠ）的HPV E5引物,分别... 

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
英文缩略词表
中文摘要
英文摘要
正文
    前言
    第一部分
        1 引言
        2 材料与方法
        3 结果
        4 讨论
    第二部分
        1 引言
        2 材料与方法
        3 结果
        4 讨论
    第三部分
        1 引言
        2 材料与方法
        3 结果
        4 讨论
    小结
    参考文献
附录
致谢
综述及其参考文献



本文编号：3669530