变形链球菌对人牙本质源MMPs活性的影响

发布时间：2017-05-15 14:16

  本文关键词：变形链球菌对人牙本质源MMPs活性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究目的：研究变形链球菌对人牙本质内基质金属蛋白酶溶胶原活性的影响及其作用机制。方法：复苏、培养变形链球菌,通过相差显微镜观察并鉴定。以OD600法测定变形链球菌的生长曲线。确定青链双抗溶液对牙本质粉的最小除菌浓度及变形链球菌对MNPs活性影响的最短作用时间。取21个60×15 mm培养皿,每皿置入50 mg牙本质粉,随机分为7组,每组3皿。每组牙本质粉以不同方法处理,处理结束后,每皿牙本质粉加入5 ml超纯水,37℃封闭孵育,在1D,3D,7D分别取50μl孵育液,用ICTP ELIZA试剂盒测定其中ICTP浓度。另取30个60×15 mm培养皿,每皿置入50 mg牙本质粉,随机分为6组,每组5皿。各组培养皿中加入不同处理溶液,然后将各组培养皿置于孵育箱37℃孵育48 h,弃去处理液,超纯水洗涤5次,加入5 ml超纯水,37℃恒温孵育7D。各皿取50μl孵育液,用ICTP ELIZA试剂盒测定其中ICTP浓度。结果：(1)各组牙本质粉释放的ICTP值均随孵育时间的延长而升高(P0.05)；无论是否以EDTA脱矿处理,用变形链球菌悬液或其代谢产物混合溶液处理的牙本质粉均较对照组释放更多ICTP(P0.05)；以EDTA脱矿处理后,细菌悬液和代谢产物混合溶液处理的牙本质粉较单独用菌悬液和代谢产物混合溶液处理的牙本质粉释放更多ICTP(P0.05)；在第7天时,菌悬液处理组较代谢产物混合液处理组释放更多ICTP(P0.05)。(2)对照组孵育液中ICTP值均小于其它各组(P0.05)；菌悬液处理组和细菌裂解物溶液+代谢产物混合液处理组牙本质粉所释放的ICTP浓度无显著差异(P0.05)；各细菌裂解物溶液处理组的牙本质粉所释放的ICTP浓度呈现明显的浓度依赖性,即随着细菌裂解物溶液浓度降低,ICTP释放量随之减少(P0.05)。结论：无论处于脱矿或矿化状态,变形链球菌均可激活人牙本质中MMPs的溶胶原活性,且这种激活作用主要来源于其代谢产物和菌体蛋白的作用。
【关键词】：变形链球菌 牙本质 EDTA MMPs ICTP
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R780.2
【目录】：

• 缩略词表6-7
• 前言7-9
• 中文摘要9-11
• Abstract11-13
• 实验一 变形链球菌的培养及牙本质粉的制备与处理13-22
• 1 材料13-14
• 1.1 实验材料13-14
• 1.2 实验仪器14
• 2 方法14-17
• 2.1 变形链球菌的复苏与培养14
• 2.2 变形链球菌的观察与鉴定14
• 2.3 变形链球菌生长曲线的绘制14-15
• 2.4 牙本质粉的制备15
• 2.5 青链双抗溶液的稀释15-16
• 2.6 青链双抗溶液对牙本质粉最小除菌浓度16
• 2.7 变形链球菌引起牙本质源MMPs活性改变的最短作用时间16
• 2.8 ICTP标准曲线的绘制和ICTP浓度测定16
• 2.9 统计学处理16-17
• 3 结果17-19
• 3.1 相差显微镜观察及鉴定结果17
• 3.2 变形链球菌的生长曲线17-18
• 3.3 青链双抗溶液对牙本质粉最小除菌浓度18-19
• 3.4 变形链球菌引起牙本质源MMPs活性改变的最短作用时间19
• 4 讨论19-21
• 5 结论21-22
• 实验二 变形链球菌及其代谢产物对牙本质源MMPs活性的影响22-29
• 1 材料23
• 1.1 实验材料23
• 1.2 实验仪器23
• 2 方法23-25
• 2.1 牙本质粉的制备23
• 2.2 变形链球菌标准菌悬液的制备23
• 2.3 变形链球菌代谢产物混合溶液的制备23-24
• 2.4 实验分组及处理24
• 2.5 ICTP标准曲线的测量及各实验组数据的测量24-25
• 2.6 统计学处理25
• 3 结果25-27
• 4 讨论27-28
• 5 结论28-29
• 实验三 变形链球菌菌体蛋白对牙本质MMPs活性的影响29-36
• 1 材料30
• 1.1 实验材料30
• 1.2 实验仪器30
• 2 方法30-32
• 2.1 牙本质粉的制备30
• 2.2 变形链球菌标准菌悬液的制备30
• 2.3 变形链球菌菌体蛋白的制备30-31
• 2.4 牙本质粉分组及处理31-32
• 2.5 ICTP标准曲线的绘制和ICTP浓度的测定32
• 2.6 统计学处理32
• 3 结果32-34
• 4 讨论34-35
• 5 结论35-36
• 全文总结36-38
• 文献回顾38-45
• 1 龋病与变形链球菌38-40
• 1.1 龋病38
• 1.2 变形链球菌38
• 1.3 变形链球菌的致龋作用38-40
• 2 基质金属蛋白酶40-43
• 2.1 基质金属蛋白酶概述40-41
• 2.2 牙本质源MMPs41-42
• 2.3 牙本质源MMPs激活机制的研究现状42
• 2.4 牙本质源MMPs活性检测技术42-43
• 3. 变形链球菌与牙本质源MMPs43-45
• 3.1 牙本质源MMPs在龋病中的作用43
• 3.2 变形链球菌对牙本质源MMPs的作用43-45
• 参考文献45-52
• 攻读学位期间发表文章情况52-53
• 致谢53

【共引文献】

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本文编号：368010