miR-200a在TGF-β诱导口腔黏膜修复中的功能研究

发布时间：2022-10-19 19:57

　　目的探索miR-200a在TGF-β诱导口腔黏膜修复过程中表达水平的变化和功能。方法分离培养原代人牙龈成纤维细胞（Human Gingival Fibroblast,HGF）,加入不同浓度TGF-β,实时荧光定量PCR检测miR-200表达水平的变化。通过转染miR-200a模拟物增加miR-200a表达水平,利用Transwell实验检测细胞迁移能力,利用CCK-8实验检测细胞增殖活性,利用蛋白质免疫印迹实验检测细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达水平。结果 TGF-β处理会引起HGF细胞miR-200a表达水平下降,且随着TGF-β作用浓度增加,miR-200a表达下降比例增加;与对照组相比,转染miR-200a模拟物的实验组miR-200a表达水平上升,细胞增殖活性下降,迁移到Transwell下层小室的细胞数目降低,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达水平下降。结论 miR-200a在TGF-β诱导口腔黏膜修复过程中可以抑制HGF的增殖活性、迁移能力和Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达,进而影响口腔黏膜的修复和重建。 

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验试剂及仪器
    1.2 健康牙龈标本采集及原代HGF培养
    1.3 细胞总RNA提取
    1.4 实时荧光定量PCR
    1.5 实验分组及细胞转染
    1.6 Transwell细胞迁移实验
    1.7 CCK-8检测细胞增殖
    1.8 蛋白质免疫印迹实验
    1.9 统计学方法
2 结果
    2.1 不同浓度TGF-β对HGF中miR-200a表达的影响
    2.2 细胞转染对HGF中miR-200a表达水平的影响
    2.3 过表达miR-200a对HGF增殖活性的影响
    2.4 过表达miR-200a对HGF迁移能力的影响
    2.5 过表达miR-200a对HGF中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-2053在口腔黏膜修复中对成纤维细胞的影响及其机制研究[J]. 余美婵,陈凯炎,刘思源.  组织工程与重建外科杂志. 2019(05)



本文编号：3694010