gtfB反义寡核苷酸抑制变形链球菌葡糖基转移酶的研究

发布时间：2022-12-08 23:59

　　反义寡核苷酸（Antisense oligodeoxyribonucleotide，AS-ODN）以碱基配对的形式，借助氢键结合至其互补序列，抑制靶基因转录和／或翻译，从而调节遗传信息由基因到蛋白质问的传递，与生物基因的表达、调控密切有关。该方法直接利用目标基因核苷酸序列信息设计反义序列，并依靠其高度的序列专一性，特异的使靶基因沉默或表达下调，能够明确靶基因的功能，并达到治疗效果，已经广泛用于肿瘤、病毒感染、器官移植排斥反应等疾病的治疗研究。反义技术操作简单，高效、快速、低毒，并且实验周期短，可进行高通量筛选分析，具有明显的量效关系，可作为候选药物。虽然反义现象天然存在于原核细胞中，但是细菌细胞壁妨碍AS-ODN进入细胞中，胞浆中不能达到有效浓度，限制了它在原核细胞中的应用。随着对AS-ODN进行化学修饰的不断改进及载体研究的发展，AS-ODN的稳定性和通过细胞壁的能力有了极大地提高，已成功用于下调细菌毒力因子、抗性基因和基础基因的表达，降低了细菌的毒性，增加了细菌对抗菌药物的敏感性，抑制了细菌的生长。靶向细菌毒力因子的AS-ODN仅作用于单一病原菌（或限于几种病原菌），有利于减少对宿... 

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
缩略语表
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英文摘要
前言
文献回顾
第一部分 设计gtfB反义寡核苷酸并优化其转化变形链球菌的条件和方法
    实验一 设计、合成gtfB反义寡核苷酸序列
        1 材料和方法
        2 结果
    实验二 优化寡核苷酸转化变形链球菌的条件和方法
        1 材料和方法
        2 结果
    讨论
    参考文献
第二部分 gtfB反义寡核苷酸对变形链球菌GTF-Ⅰ表达及活性的影响
    实验一 RT-PCR观察gtfB反义PS-ODN对GTF-Ⅰ mRNA水平的影响
        1 材料和方法
        2 结果
    实验二 gtfB反义脱氧寡核苷酸对变形链球菌葡糖基转移酶表达及活性的影响
        1 材料与方法
        2 结果
    讨论
    参考文献
第三部分 体外观察gtfB反义寡核苷酸对变形链球菌生物学行为的影响
    实验一 体外观察gtfB反义寡核苷酸对变形链球菌蔗糖依赖性粘附的影响
        1 材料和方法
        2 结果
    实验二 gtfB反义寡核苷酸对变形链球菌生物膜形成能力的影响
        1 材料与方法
        2 结果
    讨论
    参考文献
小结
个人简历与研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]抗菌剂作用后变形链球菌生物膜细胞活力观察[J]. 唐子圣,朱敏,刘正.  临床口腔医学杂志. 2005(07)
[2]纳米基因防龋疫苗的构建及其免疫大鼠的实验研究[J]. 卫克文,樊明文,吴补领.  武汉大学学报(医学版). 2005(03)
[3]反义核酸研究进展[J]. 王武,杨胜利,季文明,吕陈峰.  无锡轻工大学学报. 2001(05)
[4]质粒介导变形链球菌转化的研究[J]. 边专,樊明文,彭彬,范兵.  牙体牙髓牙周病学杂志. 1996(01)



本文编号：3714393