血小板反应蛋白-1对人牙周膜成纤维细胞表达IL-6及COX-2的影响

发布时间：2022-12-25 14:29

　　目的探究血小板反应蛋白（TSP）-1对人牙周膜成纤维细胞（hPDLFs）表达白细胞介素（IL）-6和环氧化酶（COX）-2的影响。方法选取12只6周龄雄性SD大鼠随机均分为正常组和牙周炎组,丝线结扎法建立实验性牙周炎大鼠模型;Western blot检测大鼠牙龈组织中TSP-1的蛋白表达;qRT-PCR检测每组牙龈组织中TSP-1、IL-6、COX-2 mRNA表达。组织块法分离培养hPDLFs,构建携带TSP-1基因的重组腺病毒（Ad-TSP-1-GFP）,同时以空载腺病毒（Ad-GFP）作为阴性对照,转染细胞;或在hPDLFs培养上清液中添加重组TSP-1蛋白（rTSP-1）。ELISA检测hPDLFs表达IL-6的蛋白水平;Western blot检测hPDLFs表达COX-2的蛋白水平;qRT-PCR检测IL-6、COX-2 mRNA表达水平。结果与正常组比较,实验性牙周炎大鼠牙龈组织中TSP-1蛋白和mRNA表达升高,且IL-6和COX-2 mRNA表达升高。与Ad-GFP组比较,Ad-TSP-1-GFP转染hPDLFs可明显提高细胞TSP-1蛋白和mRNA水平,同时可促进h... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1. 2 材料
    1.3 方法
        1.3.1 实验性大鼠牙周炎模型建立
        1.3.2 骨丧失量测量
        1.3.3 hPDLFs的分离培养
        1.3.4 hPDLFs的免疫组化鉴定
        1.3.5 P. gingivalis LPS(10 μg/ml)诱导hPDLFs
        1.3.6 携带TSP-1基因的重组腺病毒(Ad-TSP-1-GFP)体外转染hPDLFs
        1.3.7 rTSP-1体外刺激hPDLFs
        1.3.8 qRT-PCR检测mRNA水平
        1.3.9 ELISA检测细胞培养上清液中IL-6水平
        1.3.10 Western blot检测蛋白水平
    1.4 统计学处理
2 结果
    2.1 大鼠实验牙ABL检测
    2.2 大鼠牙龈组织中TSP-1、IL-6、COX-2的表达
    2.3 hPDLFs的免疫组化鉴定
    2.4 P. gingivalis LPS促进hPDLFs TSP-1表达
    2.5 细胞转染效率
    2.6 Ad-TSP-1-GFP 转染hPDLFs的效果
    2.7 TSP-1促进hPDLFs IL-6的表达
    2.8 TSP-1促进hPDLFs COX-2的表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]β-隐黄素对实验性牙周炎大鼠氧化应激的影响[J]. 崔晓宇,王国芳,李小红,张朋,李冬雪,轩亚茹.  安徽医科大学学报. 2018(10)



本文编号：3726793