血小板衍生生长因子BB对牙周膜干细胞生物学特性的影响

发布时间：2023-01-04 18:50

　　目的:观察血小板衍生生长因子BB（platelet derived growth factor BB, PDGFBB）基因修饰人牙周膜干细胞（human periodontal stem cells, h PDLSCs）的生物学特性,探讨PDGFBB对hPDLSCs细胞增殖、迁移及诱导成骨的影响。方法:分离并扩增h PDLSCs,免疫荧光染色鉴定细胞表面标志和成骨诱导分化能力。通过慢病毒载体介导PDGFBB基因转染hPDLSCs,转染后,采用CCK-8及划痕实验检测其对细胞增殖、迁移的影响。利用实时荧光定量PCR分析PDGFBB基因转染后hPDLSCs细胞内成骨相关基因和成血管相关基因VEGF mRNA的表达水平。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:采用组织块培养及有限稀释法成功获得hPDLSCs。PDGFBB转染hPDLSCs后,细胞形态良好,与空病毒组和未转染组相比,转染组细胞增殖及迁移能力显著上升,OPN、COL-1和VEGF mRNA表达水平显著上调（P＜0.05）。结论:慢病毒载体能在体外将PDGFBB基因转入hPDLSCs,获得持续、稳定表达。PDGFB... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与仪器
    1.2 人牙周膜干细胞的培养和鉴定
        1.2.1 hPDLSCs分离、培养及克隆筛选
        1.2.2 hPDLSCs表面标志物鉴定
        1.2.3 hPDLSCs成脂分化能力检测
    1.3 PDGFBB慢病毒转染人牙周膜干细胞及分组
        1.3.1 细胞增殖实验
        1.3.2 划痕实验分析细胞迁移能力
        1.3.3实时荧光定量PCR检测3组细胞VEGF、OPN、COL-1和OCN的m RNA表达水平
        1.3.4 3组牙周膜干细胞成骨分化能力检测
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 人牙周膜干细胞分离、培养、鉴定和克隆形成实验结果
    2.2 人牙周膜干细胞成脂分化结果
    2.3 PDGFBB慢病毒转染人牙周膜干细胞结果
    2.4 PDGFBB基因转染后细胞增殖能力检测结果
    2.5 PDGFBB基因修饰促进h PDLSCs迁移
    2.6 PDGFBB基因转染后促进h PDLSCs细胞成骨相关基因OPN、OCN、COL-1和成血管相关基因VEGF的表达
    2.7 慢病毒转染前、后人牙周膜干细胞成骨能力比较
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]rhPDGF-BB对糖尿病大鼠骨髓基质干细胞迁移的促进作用[J]. 王德芳,刘燕,王珏.  上海口腔医学. 2018(06)
[2]p38 MAPK通路调控BMP9诱导hPDLSCs成骨分化的体外研究[J]. 张奕,胡婷,叶国,向学熔,胡娜.  上海口腔医学. 2018(06)
[3]慢病毒介导的EphrinB2基因转染大鼠骨髓间充质干细胞表达的实验研究[J]. 朱敏,徐运,张跃,汤健,华裕,赵晓科,杜森杰.  中风与神经疾病杂志. 2017(06)
[4]绿色荧光蛋白标记SOX9基因慢病毒载体的构建及在兔骨髓间充质干细胞中的表达[J]. 刘伟,王杰,幸永明,赵宏,龚德军.  中国实验诊断学. 2017(01)



本文编号：3727748