RhoA/Rock通路对应力调控脂多糖刺激的成骨细胞生长和分化的研究

发布时间：2023-01-29 08:50

　　人的骨骼一生都处于不断的改建过程中,当受到外力刺激时骨骼会发生适应性的变化,外力刺激可以促进新骨的形成,包括临床常见的牵张成骨、正畸牙齿移动过程中牙槽骨的改建等。正畸牙齿移动过程中,牙齿存在两个主要的受力面,压力面骨质吸收,张力面骨质增生,从而使牙齿移动到目标位置。在这一过程中,成骨细胞发挥了重要作用。临床上,有许多牙周病患者需要通过正畸治疗集中牙齿间隙,为后期修复治疗做准备。由于牙周病患者的牙周支持组织薄弱,因此在矫治过程中矫治力大小的控制尤为重要,机械应力对骨组织的改建具有促进作用,但是炎症状态下,骨骼改建的力学效应更加复杂。有研究发现机械牵张力可通过RhoA/ROCK信号通路调节成骨细胞的分化,但是,炎性环境下,机械牵张力对成骨细胞生长特性以及细胞内RhoA/ROCK信号通路的影响尚不清楚。该实验在实验组前期研究结果的基础上,以1ug/ml Pg-LPS（牙龈卟啉单胞菌来源的脂多糖）刺激小鼠成骨样细胞（MC3T3-E1）,模拟建立体外口腔炎性环境,应用Flex-cell 5000应力加载系统给成骨细胞施加8%牵张应力刺激,观察细胞的生长情况,通过RT-PCR、Western bl... 

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
第一章 绪论
    1.1 牙周病炎症因子与成骨细胞的相互作用
        1.1.1 牙周病与炎症因子
        1.1.2 炎症因子与成骨破骨作用
    1.2 机械应力对成骨细胞的调控作用
        1.2.1 细胞应力加载模式
        1.2.2 成骨细胞力学转导相关信号通路
        1.2.3 应力刺激与成骨细胞RhoA/ROCK的关系
第二章 机械牵张力对Pg-LPS诱导下成骨细胞生长的影响
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验试剂
        2.1.2 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 Pg-LPS工作液的配置
        2.2.3 Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测牵张应力对Pg-LPS刺激下成骨细胞增殖活性的响
        2.2.4 Hoechst33258 染色观察械牵张力对Pg-LPS诱导下成骨细胞凋亡的影响
        2.2.5 鬼笔环肽Phalloidin-TRITC染色观察牵张应力对Pg-LPS刺激下成骨细胞骨架的影响
        2.2.6 统计学分析
    2.3 结果
        2.3.1 机械牵张力对Pg-LPS刺激下成骨细胞活性的影响
        2.3.2 机械牵张力对Pg-LPS刺激下成骨细胞凋亡的影响
        2.3.3 机械牵张力对Pg-LPS刺激下成骨细胞骨架的影响
    2.4 讨论
第三章 牵张应力对LPS刺激下成骨细胞内RhoA、ROCK、Runx-2表达的影响
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验试剂
        3.1.2 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 细胞培养
        3.2.2 牵张应力加载Pg-LPS、C3 处理的成骨细胞
        3.2.3 细胞蛋白的提取
        3.2.4 蛋白免疫印迹
        3.2.5 提取细胞总RNA
        3.2.6 实时荧光定量聚合酶反应
        3.2.7 统计学分析
    3.3 结果
    3.4 讨论
小结
参考文献
在学期间的研究成果
致谢
临床病例



本文编号：3732688