唑来膦酸对颞下颌关节骨关节炎软骨细胞增殖及凋亡的作用研究

发布时间：2023-02-13 17:30

　　目的探索唑来膦酸在颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)软骨细胞增殖及凋亡的作用。方法用10 ng·mL^-1白细胞介素-1β(IL-1β)诱导髁突软骨细胞构建TMJOA细胞模型,并随机分为对照组和低、高剂量实验组,分别用0,10和100 nmol·L^-1唑来膦酸干预培养。用Western Blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和Caspase-9蛋白的表达情况,用流式细胞技术检测细胞凋亡比例;最后加入Wnt/β-catenin通路抑制剂(XAV939)与激动剂(LiCl),在显微镜下观察软骨细胞状态变化。结果干预48 h后,对照组和低、高剂量实验组的PCNA蛋白相对表达量分别为0.36±0.01,0.21±0.01和0.20±0.01,Caspase-3蛋白相对表达量分别为0.75±0.02,1.11±0.03和1.03±0.03,低、高剂量实验组的上述指标与对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.001)。流式结果显示,高剂量实验组处理24和48 h后,软骨细胞凋亡比率分别为(29.05±3.43)%...

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【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 建立TMJOA体外细胞模型[5-7]
        2.2 细胞分组与给药方法
        2.3 主要观察指标
            2.3.1 用RT-PCR法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和Caspase-9基因的表达水平[8]
            2.3.2 用Western Blot法检测PCNA和Caspase-3蛋白的表达水平[9]
        2.4 次要观察指标
            2.4.1 镜下观察给药后TMJOA软骨细胞形态[10]
            2.4.2 以流式细胞技术测定细胞凋亡率[9]
            2.4.3 镜下观察给予Wnt信号通路抑制药后TMJOA软骨细胞形态改变[8]
    3 统计学处理
结 果
    1 10 ng·mL-1 IL-1β诱导6 h可成功构建TMJOA细胞模型
    2 唑来膦酸抑制TMJOA软骨细胞增殖和促进凋亡
    3 唑来膦酸促进TMJOA软骨细胞凋亡
    4 唑来膦酸对TMJOA软骨细胞状态影响
    5 Wnt/β-catenin通路对唑来膦酸作用TMJOA软骨细胞状态的影响
讨 论



本文编号：3741999