唾液腺腺样囊性癌来源的外泌体促进癌细胞的增殖、迁移及侵袭

发布时间：2023-03-12 16:40

　　目的:探索人唾液腺腺样囊性癌不同细胞系分泌的外泌体对其癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:使用ExoEasy Maxi Kit (Qiagen,Hilden,Germany)试剂盒提取外泌体,通过透射电镜、纳米粒子跟踪分析(NTA)、蛋白免疫印迹Western blotting技术鉴定提取的肿瘤外泌体。并在外泌体的干预下,采用CCK-8法、平板克隆形成实验、细胞划痕及Transwell实验检测细胞增殖、迁移及侵袭能力。结果:透射电镜及纳米粒子跟踪分析(NTA)检测显示:提取的外泌体主要直径在30～150 nm之间,其形态呈典型的"茶托型"结构;Western blotting检测到外泌体特异性标志蛋白CD9、CD63及TSG101呈阳性表达。CCK-8法及平板克隆实验显示唾液腺腺样囊性癌来源的外泌体可增强其癌细胞增殖能力(P<0.05)。细胞划痕及Transwell实验表明其外泌体可增强癌细胞迁移及侵袭能力(P<0.05)。结论:唾液腺腺样囊性癌不同细胞系均分泌外泌体。唾液腺腺样囊性癌外泌体可增强其癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂及仪器
    1.2 实验分组
    1.3 腺样囊性癌细胞株SACC-lm(高转移株)、SACC-83传代培养及外泌体提取
    1.4 外泌体鉴定
        1.4.1 外泌体透射电镜鉴定
        1.4.2 外泌体NTA粒径分析鉴定
        1.4.3 Western blotting鉴定外泌体特异性蛋白
    1.5 CCK-8实验检测细胞增殖能力
    1.6 平板克隆形成实验
    1.7 划痕实验检测细胞迁移能力
    1.8 Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 两种SACC细胞系外泌体的鉴定
    2.2 CCK-8实验及平板克隆形成实验检测细胞增殖能力
    2.3 细胞划痕实验检测细胞迁移能力
    2.4 Transwell细胞迁移及侵袭实验结果
3 讨论



本文编号：3761574