根吸收不同时期乳牙牙周膜干细胞通过NK细胞进行免疫调节作用的研究

发布时间：2023-04-05 02:08

　　目的探讨根吸收不同时期乳牙牙周膜干细胞(PDLSCs)通过自然杀伤细胞(NK)发挥破骨分化的调节作用。方法酶消化法和有限稀释法分离培养根吸收不同时期乳牙和恒牙与PDLSCs与NK细胞、RAW264.7细胞进行共培养。采用实时定量PCR和ELISA,检测各组共培养体系中NK细胞IFN-γ表达及其差异,以及阻断转化生长因子-β(TGF-β)后IFN-γ的表达及差异。采用实时定量PCR和Western blot检测NK细胞、RAW264.7细胞共培养体系中RAW264.7细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)表达。结果根吸收中期组(B)NK细胞干扰素γ(IFN-γ)表达明显下降(P<0.05)。阻断TGF-β后,IFN-γ表达明显升高(P<0.05)。外源性加入NK细胞与PDLSCs共培养上清液后,RAW264.7细胞RANKL表达降低,OPG表达升高,RANKL/OPG比值降低。结论在乳牙生理性根吸收过程中,PDLSCs通过分泌TGF-β等细胞因子对NK细胞发挥免疫抑制作用,影响破骨分化进程。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要材料与试剂
    1.2 方法
        1.2.1 样本的收集与分类
        1.2.2 乳牙PDLSCs的分离培养
    1.3 NK细胞与乳牙PDLSCs、RAW264.7细胞共培养
    1.4 ELISA检测
    1.5 实时定量PCR检测
    1.6 Western blot检测
    1.7 统计学方法
2 结 果
    2.1 生理性根吸收不同时期PDLSCs的分离培养
    2.2 PDLSCs 表面标志物的鉴定结果
    2.3 不同根吸收期乳牙PDLSCs与NK细胞共培养后NK细胞IFN-γ变化
    2.4 抑制乳牙PDLSCs TGF-β分泌后NK细胞IFN-γ的表达情况
    2.5 与NK细胞或根吸收中期组PDLSCs共培养后RAW264.7细胞RANKL/OPG基因表达的检测
3 讨 论



本文编号：3782514