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肿瘤诱导血管新生微流控芯片模型的构建和应用

发布时间:2023-04-07 00:17
  目的:血管新生是肿瘤生长和转移的必要条件,传统血管新生体外模型在模拟体内肿瘤诱导血管新生过程中存在明显不足,本研究拟以微流控芯片技术为主要手段,构建肿瘤诱导血管新生体外研究模型,并在此模型上对涎腺腺样囊性癌(Salivary Gland Adenoid Cystic Carcinoma,ACC)和头颈部鳞状细胞癌(Head andNeck Squamous Cell Carcinoma,HNSCC)诱导的血管新生进行研究。 材料和方法:本实验采用软光刻技术制备微流控芯片模版,采用聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane, PDMS)做为芯片材料灌制基片,用等离子处理PDMS基片和载玻片,实现基片与载玻片的不可逆封接。本实验采用的细胞株有脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cell, HUVEC),ACC高转移细胞株ACC-M,舌鳞状细胞癌细胞株SCC-6,原代正常成纤维细胞(Normal Fibroblasts,NF)。采用基底膜样物质(Basement Membrane Extract, BME)作为细胞外基质(Ext...

【文章页数】:54 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    1. 仪器和试剂
        1.1 芯片制作仪器
        1.2 细胞培养仪器
        1.3 芯片制作试剂
        1.4 细胞培养试剂
        1.5 细胞免疫荧光染色试剂
    2. 微流控芯片的制备
        2.1 SU-8 模板制作
        2.2 PDMS 芯片成型和封接
    3. 常规细胞株的培养
        3.1 实验所用细胞
        3.2 培养方法
    4. 原代正常成纤维细胞(Normal Fibroblasts,NF)的提取和培养
    5. 芯片 BME 进样和细胞进样
        5.1 芯片 BME 进样
        5.2 芯片细胞进样
    6. 芯片细胞免疫荧光染色
    7. 图像采集和数据分析
        7.1 图像的采集
        7.2 HUVEC 细胞分化的分析
        7.3 迁移方向的分析
        7.4 迁移距离的计算
        7.5 迁移面积的计算
    8. 统计学分析
结果
    1. 微流控芯片的设计和模型构建
    2. NF 诱导的血管新生
    3. ACC-M 诱导的血管新生
    4. SCC-6 诱导的血管新生
    5. 肿瘤细胞诱导的管腔形成
    6. 不同细胞诱导血管新生能力分析
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢



本文编号:3784700

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