酶谱法研究牙本质粘结中MMP-2和MMP-9在抑制剂作用下的表达

发布时间：2023-04-24 23:48

　　目的:探讨牙本质在酸蚀-冲洗和自酸蚀两种粘结体系中MMP-2和MMP-9在抑制剂作用下的表达情况,应用酶谱法分析二者在即刻和老化粘结中的活性水平,为临床应用基质金属蛋白酶抑制剂提高粘结效果提供实验性依据。方法:收集20颗成人新鲜离体第三磨牙,液氮冷却下将其研磨为牙本质粉。模拟口内条件,将牙本质粉进行自酸蚀粘结(Single Bond Universal)和酸蚀-冲洗粘结35%磷酸凝胶+ Adpter Single Bond 2)处理。以不进行任何处理的牙本质粉为阴性对照组;以只进行酸蚀处理的牙本质粉为阳性对照组;以只进行粘结处理的牙本质粉为空白对照组;在粘结过程中使用基质金属蛋白酶抑制剂氯己定(clorhexidine,CHX)和米诺环素(minocyline,MI)预处理作为实验组,将其标记为CHX预处理组和MI预处理组。在以上条件基础上使用10%次氯酸钠进行牙本质老化,并分别标记为空白老化对照组、CHX预处理组和MI预处理老化组。采用明胶酶谱法进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,孵育染色脱色后,用凝胶图像分析系统分析条带,以阴性对照组条带相对灰度值为1,将相对应条带灰度值比值作为评价指标。结果...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
英文缩略语表
第1章 前言
    1.1 基质金属蛋白酶的相关研究
        1.1.1 基质金属蛋白酶的结构和功能
        1.1.2 基质金属蛋白酶在牙本质中的作用
        1.1.3 MMP-2和MMP-9在牙本质中的分布和意义
    1.2 基质金属蛋白酶抑制剂
        1.2.1 氯己定(clorhexidine,CHX)
        1.2.2 四环素类
    1.3 牙本质粘结剂的分类及特点
    1.4 本研究的设计思路和研究意义
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料及试剂
        2.1.1 实验牙齿
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 实验设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 收集离体牙
        2.2.2 牙本质粉的制备
        2.2.3 实验试剂的配制
        2.2.4 实验分组及处理
        2.2.5 牙本质粉中蛋白的提取
        2.2.6 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
        2.2.7 MMP-2和MMP-9的复性
        2.2.8 凝胶图像分析及计算
    2.3 统计学分析
第3章 实验与结果
    3.1 酸蚀-冲洗粘结后中各组牙本质粉中MMP-2和MMP-9中的表达水平
        3.1.1 即刻粘结组
        3.1.2 粘结老化组
    3.2 自酸蚀粘结剂粘结后中各组牙本质粉中MMP-2和MMP-9中的表达水平
        3.2.1 即刻粘结组
        3.2.2 粘结老化组
    3.3 两种MMPs抑制剂在不同粘结条件下对MMP-2和MMP-9的作用
        3.3.1 酸蚀-冲洗粘结系统
        3.3.2 自酸蚀粘结剂
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢



本文编号：3800269