电压门控钠通道Nav1.7在大鼠牙髓炎中表达的研究
发布时间:2023-07-25 00:36
目的电压门控钠离子通道(voltage gated sodium channel,VGSC) Nav1.7主要表达于外周神经系统中,对动作电位有显著调节作用,参与炎症刺激和神经损伤所致疼痛过程。支配牙髓感觉功能的神经纤维是疼痛感受器。正常的牙髓组织对外界刺激不敏感,然而在病变状态下,电源性、热源性、机械性以及化学性的刺激均会伴随着伤害感受器的反应。通过检测大鼠实验性牙髓炎牙髓中电压门控钠离子通道Nav1.7的表达,探讨Nav1.7的表达与牙髓炎痛觉致敏的关系,为寻找切实有效的缓解牙痛的方法提供新的思路。 方法48只大鼠随机均分为正常对照(A)组,炎症组:封LPS1d(B)组、3d(C)组、5d(D)组。炎症组大鼠切牙髓腔暴露,置入脂多糖(LPS)诱导产生牙髓炎。HE染色观察上述各组牙髓组织病理学改变,并分别采用免疫组织化学染色、ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法检测大鼠正常牙髓和炎症牙髓中Nav1.7的表达。 结果处理后1d组,牙髓中未见明显炎症,而处理后3d组和5d组牙髓中炎症反应程度逐渐上升。免疫组化结果显示,Nav1.7在所有牙髓中均有表达,处理后3d组和5d...
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
英文缩略词表
中文摘要
Abstract
1 引言
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 主要试剂
2.1.3 常用试剂
2.1.4 主要仪器设备
2.1.5 其他实验用品
2.1.6 实验中的常用试剂配制
2.2 方法
2.2.1 动物分组和实验性牙髓炎模型的建立
2.2.2 动物一般情况观察
2.2.3 心脏灌流和牙髓切片常规HE染色观察
2.2.3.1 心脏灌流
2.2.3.2 牙髓切片常规HE染色观察
2.2.4 酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中Nav1.7 蛋白的表达
2.2.4.1 取材
2.2.4.2 ELISA法检测牙髓组织中Nav1.7蛋白的表达
2.2.5 免疫组织化学染色法检测大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中Nav1.7蛋白的表达
2.2.5.1 取材
2.2.5.2 免疫组织化学染色
2.2.6 大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中Nav1.7-mRNA的相对表达量检测
2.2.6.1 总RNA的抽提、cDNA的逆转录和PCR扩增
2.2.6.2 琼脂糖凝胶电泳和图像分析
2.2.7 数据统计分析
3 结果
3.1 动物一般情况观察结果
3.2 牙髓切片常规HE染色观察结果
3.3 Nav1.7 在大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中的表达情况
3.3.1 Nav1.7 ELISA结果
3.4 Nav1.7 在大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中的表达情况
3.4.1 Nav1.7免疫组织化学染色结果
3.5 Nav1.7 -mRNA在大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中的相对表达情况
3.5.1 总RNA纯度及完整性检测
3.5.2 RT-PCR检测Nav1.7-mRNA的相对表达量
4 讨论
4.1 Nav1.7 与疼痛
4.2 口颌面疼痛的传导机制
4.3 Nav1.7 与口颌面疼痛的潜在关联
4.4 临床应用前景
5 结论
6 参考文献
附录
致谢
综述
参考文献
本文编号:3836821
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
英文缩略词表
中文摘要
Abstract
1 引言
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 主要试剂
2.1.3 常用试剂
2.1.4 主要仪器设备
2.1.5 其他实验用品
2.1.6 实验中的常用试剂配制
2.2 方法
2.2.1 动物分组和实验性牙髓炎模型的建立
2.2.2 动物一般情况观察
2.2.3 心脏灌流和牙髓切片常规HE染色观察
2.2.3.1 心脏灌流
2.2.3.2 牙髓切片常规HE染色观察
2.2.4 酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中Nav1.7 蛋白的表达
2.2.4.1 取材
2.2.4.2 ELISA法检测牙髓组织中Nav1.7蛋白的表达
2.2.5 免疫组织化学染色法检测大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中Nav1.7蛋白的表达
2.2.5.1 取材
2.2.5.2 免疫组织化学染色
2.2.6 大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中Nav1.7-mRNA的相对表达量检测
2.2.6.1 总RNA的抽提、cDNA的逆转录和PCR扩增
2.2.6.2 琼脂糖凝胶电泳和图像分析
2.2.7 数据统计分析
3 结果
3.1 动物一般情况观察结果
3.2 牙髓切片常规HE染色观察结果
3.3 Nav1.7 在大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中的表达情况
3.3.1 Nav1.7 ELISA结果
3.4 Nav1.7 在大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中的表达情况
3.4.1 Nav1.7免疫组织化学染色结果
3.5 Nav1.7 -mRNA在大鼠实验性牙髓炎模型牙髓组织中的相对表达情况
3.5.1 总RNA纯度及完整性检测
3.5.2 RT-PCR检测Nav1.7-mRNA的相对表达量
4 讨论
4.1 Nav1.7 与疼痛
4.2 口颌面疼痛的传导机制
4.3 Nav1.7 与口颌面疼痛的潜在关联
4.4 临床应用前景
5 结论
6 参考文献
附录
致谢
综述
参考文献
本文编号:3836821
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