变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因克

发布时间：2023-08-30 00:34

　　龋病是一种多因素引起的细菌感染性疾病，变形链球菌是其主要致病菌。葡聚糖结合蛋白是变形链球菌的主要致龋毒力因子之一，在细菌的黏附和聚集，促进菌斑的形成中起着重要作用。免疫防龋是目前龋病预防研究的热点之一。基因疫苗是上世纪90年代发展起来的一种诱导免疫治疗的新方法，与减毒活疫苗、灭活疫苗、重组亚单位疫苗等疫苗相比，它具有长期稳定表达抗原蛋白，在宿主体内表达的蛋白与天然构象更为接近，抗原性更强等优点。目前，基因疫苗免疫防龋仅限于对变形链球菌表面蛋白、葡糖基转移酶、葡聚糖结合蛋白A的研究，关于利用葡聚糖结合蛋白B构建防龋基因疫苗的研究国内外还未见报道。已有的研究证实，葡聚糖结合蛋白B具有良好的免疫原性，但能否作为免疫防龋的候选基因疫苗，正是本研究所要解决的问题。 本研究从变形链球菌S. mutans Ingbritt基因组DNA中克隆出gbpB的全长编码区基因片段，进行原核表达，获取大量纯化蛋白，同时制备抗GbpB的特异性抗体；构建GbpB的真核表达质粒作为基因疫苗，通过不同途径免疫动物，观察基因疫苗的免疫效果；通过建立定菌鼠实验模型，观察了重组纯化蛋白和基因疫苗的抑龋效果，充分说明了...

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

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前言
文献回顾
实验研究
    第一部分 变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因的克隆和序列分析
    第二部分 变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因在原核和真核细胞中的表达
        实验一 变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因在大肠杆菌中的表达
        实验二 变形链球菌葡聚糖结合蛋白B的大量表达、纯化和抗体制备
        实验三 变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因在COS-7细胞中的表达
    第三部分 基因防龋疫苗免疫动物及抑龋实验研究
        实验一 基因防龋疫苗不同途径免疫SD大鼠的实验研究
        实验二 防龋疫苗抑龋的动物实验研究
全文总结
致谢
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本文编号：3844588