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人β 2 防御素的重组表达、纯化与活性分析及其mRNA在牙龈上皮的表达

发布时间:2023-11-18 13:54
  应用基因工程技术重组表达人β-防御素2(HBD-2),并检测了牙龈上皮细胞中HBD-2 mRNA的表达。建立了从获得基因、载体构建,到表达优化,直至产物分离纯化、生物活性测定等整套工艺。本研究的主要创新之处在于构建了TrxA、His?Tag、肠激酶和HBD-2融合蛋白表达,使对宿主有危害的表达产物在细胞内作用被掩蔽而得以表达,同时使得纯化蛋白的程序减少,提高目的蛋白的回收率,在国内尚未见到与本研究相同的报道。HBD-2在慢性牙周炎牙龈上皮中的表达,证实HBD-2在牙龈组织中既有固有表达又有诱导性表达,可以其双重作用来辅助传统抗生素预防和治疗口腔微生物感染。由于防御素具有高效、广谱的抗微生物活性和潜在的抗肿瘤活性等,可望作为一类新型的多肽抗生素在临床上应用。

【文章页数】:108 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
英文缩写词
前言
综述一:β-防御素的研究进展
综述二:牙周病的发病机制和药物治疗现状
实验一 HBD-2mRNA 在牙龈上皮细胞中的表达
    材料与方法
        1. 材料
        2. 方法
    结果
    讨论
实验二 HBD-2 融合蛋白的基因构建和高效表达
    材料与方法
        1. 材料
        2. 方法
    结果
    讨论
实验三 HBD-2 工程菌表达条件的优化和产物结构分析
    材料与方法
        1. 材料
        2. 方法
    结果
    讨论
实验四 HBD-2 工程菌发酵及纯化工艺的研究
    材料与方法
        1. 材料
        2. 方法
    结果
    讨论
实验五 HBD-2 重组蛋白体外抑菌和肿瘤细胞毒性实验
    材料与方法
        1. 材料
        2. 方法
    结果
    讨论
结论
附图
参考文献
攻博期间发表的论文
致谢
中文摘要
英文摘要



本文编号:3865417

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